Úvod
Zkumavky na obrázku jsou drženy pod úhlem pro demonstraci koagulace králičí plazmy po inkubaci citrované králičí plazmy s kulturami Staphylococcus aureus (horní zkumavka) nebo Staphylococcus epidermidis (spodní zkumavka). Všimněte si mírně zakalené gelovité sraženiny v horní zkumavce obsahující koagulázopozitivní organismus. Plazma ve spodní zkumavce obsahující koaguláza-negativní organismus se při držení pod úhlem nedrží u dna zkumavky.
Metody
Bakteriální kultury S. aureus a S. epidermidis byly inkubovány při 37oC po dobu 16 hodin v tryptickém sójovém bujónu. Jedna desetina mililitru každé kultury byla umístěna do skleněné zkumavky obsahující 0,4 ml citrované králičí plazmy (Lampmire Biological Laboratories). Obě zkumavky, jedna obsahující S. aureus a druhá S. epidermidis, byly inkubovány ve vodní lázni o teplotě 37 °C po dobu 24 hodin. Koaguláza-pozitivní organismus S. aureus způsobil, že se plazma ve zkumavce srazila (viz horní zkumavka na obrázku), zatímco koaguláza-negativní organismus S. epidermidis se nesrazila (viz spodní zkumavka na obrázku). Většina kmenů S. aureus produkuje dva typy koagulázy, vázanou koagulázu, nazývanou také shlukovací faktor, a volnou koagulázu. Vázaná koaguláza je navázána na buněčnou stěnu bakterií a může enzymaticky přeměnit fibrinogen v plazmě na nerozpustný fibrin a způsobit shlukování bakteriálních buněk. V tomto konkrétním testu není shlukování bakterií pozorováno. Tento konkrétní test je lepším měřítkem schopnosti organismu produkovat extracelulární nebo volnou koagulázu. Volná koaguláza reaguje s globulinovým plazmatickým faktorem (koaguláza-reagující faktor) za vzniku stafylotrombinu. Stafylotrombin pak katalyzuje rozklad fibrinogenu na nerozpustný fibrin. Nerozpustný fibrin pak vytvoří sraženinu, která je na obrázku vidět v horní zkumavce. Zkumavky byly drženy pod úhlem a snímek byl pořízen digitálním fotoaparátem Olympus C-3040 s rozlišením 3,3 megapixelu.
Diskuse
S. aureus je častou příčinou infekcí kůže (impetigo, vředy, karbunkly a folikulitida), měkkých tkání (celulitida), kostí (osteomyelitida) a kloubů (septická artritida) . Tento druh stafylokoka může také způsobovat řadu toxinem zprostředkovaných lidských onemocnění, jako je otrava potravinami, syndrom opařené kůže a syndrom toxického šoku. Existuje několik dalších druhů stafylokoků, které kolonizují člověka. Tyto druhy stafylokoků jsou méně často spojovány s lidskými onemocněními, ale jsou častými kontaminanty ve vzorcích odebraných z kožních a měkkotkáňových lézí. Koagulázový test je jedním ze způsobů, jak odlišit vysoce patogenní S. aureus od ostatních méně patogenních druhů stafylokoků na lidském těle. S. aureus je koaguláza pozitivní organismus, zatímco všechny ostatní stafylokokové druhy, které kolonizují člověka, jsou koaguláza negativní
1. Berke, A. a R. C. Tilton. 1986. Hodnocení rychlých koagulázových metod pro identifikaci Staphylococcus aureus. J Clin. Microbiol. 23:916-919.
2. Kloos, W. E. a K. H. Schleifer. 1975. Zjednodušené schéma pro rutinní identifikaci lidských druhů stafylokoků. J. Clin. Microbiol. 1:82-88.
3. Murray, P. R., K. S. Rosenthal a M. A. Pfaller. 2009. Staphylococcus and related gram-positive cocci (Stafylokoky a příbuzné grampozitivní koky), s. 211-214. In P. R. Murray, K. S. Rosenthal, and M. A. Pfaller (ed.), Medical microbiology, 6. vydání. Mosby Elsevier Publishers, Philadelphia, PA.
4. Yrios, J. W. 1977. Porovnání králičí a prasečí plazmy ve zkumavkovém koagulázovém testu. J. Clin. Microbiol. 5 :221-224.
