Jste zmateni?
- Formaldehyd je CH2O, nejjednodušší aldehyd.
- Formalín je název pro nasycený (37%) roztok formaldehydu. Protokol požadující 10% formalin tedy zhruba odpovídá 4% formaldehydu. Pozor však na to, že některé roztoky obsahují metanol, který zastavuje polymeraci, ale to by mohlo mít negativní vliv na váš vzorek.
- Paraformaldehyd (PFA) je vlastně polymerizovaný formaldehyd. „Čistý“ formaldehyd bez metanolu lze vyrobit zahřátím pevného PFA. Mohlo by se to nazývat paraformaldehyd, ale ve skutečnosti to tak není, protože se nejedná o polymerní formu. Můžete si koupit formaldehyd třídy EM nebo si můžete vyrobit vlastní…
Výroba roztoku paraformaldehydu
4% paraformaldehyd se obvykle vyrábí v PBS nebo TBS při 70 °C s několika kapkami 5N NaOH, které pomohou roztok vyčistit. Pokud nechcete být sami mírně fixováni, připravte 4% roztok paraformaldehydu v chemické digestoři.
Často mají zásoby PFA nerozpustné nečistoty a ty je nejlepší odstranit rychlým odstředěním ve stolní centrifuze nebo průchodem připraveného roztoku filtrační stříkačkou. Je také důležité si uvědomit, že účinnost a obsah nečistot v práškovém PFA se může značně lišit podle jednotlivých šarží činidla. Nebuďte překvapeni, že při otevření nové lahvičky PFA bude možná nutné upravit podmínky fixační koncentrace &.
Roztok můžete skladovat, ale všechny roztoky se časem kazí, takže často je nejlepší používat čerstvě připravené roztoky, které jsou bezbarvé. (Typické je skladování alikvotů při -20 °C a jejich používání po dobu několika měsíců).
.
