Forvirret?
- Formaldehyd er CH2O, den enkleste aldehyd.
- Formalin er navnet på en mættet (37%) formaldehydopløsning. En protokol, der kræver 10 % formalin, svarer således nogenlunde til 4 % formaldehyd. Vær dog opmærksom på, at nogle opløsninger indeholder methanol for at stoppe polymeriseringen, men dette kan have en negativ effekt på din prøve.
- Paraformaldehyd (PFA) er faktisk polymeriseret formaldehyd. “Ren”, methanolfri formaldehyd kan fremstilles ved at opvarme den faste PFA. Dette kan kaldes paraformaldehyd, men det er det faktisk ikke, fordi det ikke er den polymere form. Du kan købe formaldehyd af EM-kvalitet, eller du kan lave din egen…
Fremstilling af paraformaldehydopløsning
4% paraformaldehyd fremstilles normalt i PBS eller TBS ved 70 °C med flere dråber 5N NaOH for at hjælpe med at klarlægge opløsningen. Tilbered 4 % paraformaldehydopløsning i en kemisk emhætte, hvis du ikke selv ønsker at blive lidt fikseret.
Ofte har PFA-lagre uopløselige urenheder, og det er bedst, at disse fjernes via en hurtig centrifugering i en bordcentrifuge eller ved at lade den tilberedte opløsning passere gennem en filtersprøjte. Det er også vigtigt at være opmærksom på, at effektiviteten og indholdet af urenheder i pulverformet PFA kan variere meget fra partinummer til partinummer af reagenset. Bliv ikke overrasket, hvis dine fikseringskoncentrationer & betingelser måske skal justeres, når du åbner en ny flaske PFA.
Du kan opbevare opløsningen, men alle opløsninger bliver dårlige med tiden, så det er ofte bedst at bruge frisktilberedte opløsninger, der er farveløse. (Opbevaring af alikvotes ved -20 °C og brug af dem i løbet af et par måneder er typisk).
