Verwirrung?
- Formaldehyd ist CH2O, der einfachste Aldehyd.
- Formalin ist die Bezeichnung für gesättigte (37%) Formaldehydlösung. Ein Protokoll, das 10 % Formalin verlangt, entspricht also ungefähr 4 % Formaldehyd. Beachten Sie jedoch, dass einige Lösungen Methanol enthalten, um die Polymerisation zu stoppen, was sich jedoch negativ auf Ihre Probe auswirken kann.
- Paraformaldehyd (PFA) ist eigentlich polymerisiertes Formaldehyd. „Reines“, methanolfreies Formaldehyd kann durch Erhitzen des festen PFA hergestellt werden. Dies könnte als Paraformaldehyd bezeichnet werden, ist es aber eigentlich nicht, da es sich nicht um die Polymerform handelt. Man kann Formaldehyd in EM-Qualität kaufen oder selbst herstellen…
Herstellung einer Paraformaldehyd-Lösung
4%iges Paraformaldehyd wird normalerweise in PBS oder TBS bei 70 °C mit einigen Tropfen 5N NaOH hergestellt, um die Lösung zu klären. Bereiten Sie die 4%ige Paraformaldehydlösung in einer Chemikalienhaube zu, wenn Sie nicht selbst leicht fixiert werden wollen.
Oft enthalten PFA-Bestände unlösliche Verunreinigungen, die am besten durch schnelles Schleudern in einer Tischzentrifuge oder durch Durchleiten der vorbereiteten Lösung durch eine Filterspritze entfernt werden. Es ist auch wichtig zu wissen, dass die Wirksamkeit und der Gehalt an Verunreinigungen bei pulverförmigem PFA von Losnummer zu Losnummer des Reagenzes stark variieren können. Wundern Sie sich nicht, wenn Ihre Fixierungskonzentrationen & beim Öffnen einer neuen Flasche PFA angepasst werden müssen.
Sie können die Lösung aufbewahren, aber alle Lösungen werden mit der Zeit schlecht, so dass es oft am besten ist, frisch zubereitete Lösungen zu verwenden, die farblos sind. (Die Lagerung von Aliquoten bei -20 °C und deren Verwendung über mehrere Monate ist typisch).
