Confusé ?
- Le formaldéhyde est CH2O, l’aldéhyde le plus simple.
- La formine est le nom de la solution saturée (37%) de formaldéhyde. Ainsi, un protocole demandant 10% de formol équivaut à peu près à 4% de formaldéhyde. Attention cependant, certaines solutions contiennent du méthanol pour arrêter la polymérisation mais cela pourrait avoir un effet négatif sur votre échantillon.
- Le paraformaldéhyde (PFA) est en fait du formaldéhyde polymérisé. Le formaldéhyde « pur », sans méthanol, peut être fabriqué en chauffant le PFA solide. On pourrait l’appeler paraformaldéhyde, mais ce n’est pas le cas car il ne s’agit pas de la forme polymère. Vous pouvez acheter du formaldéhyde de qualité EM ou vous pouvez en fabriquer vous-même…
Faire une solution de paraformaldéhyde
Le paraformaldéhyde à 4% est généralement fait dans du PBS ou du TBS à 70 °C avec plusieurs gouttes de NaOH 5N pour aider à clarifier la solution. Préparez la solution de paraformaldéhyde à 4% dans une hotte chimique si vous ne voulez pas être légèrement fixé vous-même.
Souvent, les stocks de PFA contiennent des impuretés insolubles et il est préférable que celles-ci soient éliminées par un essorage rapide dans une centrifugeuse de table ou en passant la solution préparée à travers une seringue filtrante. Il est également important de réaliser que l’efficacité et la teneur en impuretés du PFA en poudre peuvent varier considérablement d’un numéro de lot à l’autre du réactif. Ne soyez pas surpris si vos concentrations de fixation &conditions doivent être revues lorsque vous ouvrez une nouvelle bouteille de PFA.
Vous pouvez conserver la solution mais toutes les solutions se dégradent avec le temps, donc utiliser des solutions fraîchement préparées et incolores est souvent préférable. (Stocker des aliquotes à -20 °C et les utiliser sur une période de quelques mois est typique).