Nella maggior parte dei gruppi, dopo che un maschio ha avvicinato con successo una femmina e l’ha montata, inserisce il suo pedipalpo sinistro nell’apertura sinistra della sua struttura genitale e il pedipalpo destro nell’apertura destra. In alcuni ragni primitivi (ad esempio, gli aplogini, i miogalomorfi) e pochi altri, il maschio inserisce entrambi i pedipalpi contemporaneamente nella fessura genitale della femmina.
La struttura genitale femminile, o epigino, è una piastra indurita sul lato inferiore dell’addome di fronte al gonoporo. Dopo che gli spermatozoi sono trasferiti nell’epigino, si spostano in ricettacoli (spermathecae) che si collegano agli ovidotti. Gli ovuli sono fecondati mentre passano attraverso gli ovidotti ed escono attraverso il gonoporo.
La forza che causa l’iniezione di sperma dal pedipalpo del maschio nel ricettacolo della femmina non è stata stabilita con certezza, ma può coinvolgere un aumento della pressione sanguigna che espande il tessuto vascolare morbido (hematodocha) tra le piastre dure dei pedipalpi. Questo fa sì che una struttura bulbosa contenente un condotto si attorcigli e si agganci all’epigono della femmina e inietti lo sperma come se fosse spremuto da una siringa a bulbo.
L’accoppiamento può richiedere solo pochi secondi in alcune specie ma ore in altre. Alcuni maschi ricaricano i loro pedipalpi e si accoppiano di nuovo con la stessa femmina. Dopo l’accoppiamento, i maschi di alcune specie spalmano una secrezione sull’epigono, chiamata tappo epiginico, che impedisce alla femmina di accoppiarsi una seconda volta. I ragni maschi di solito muoiono subito dopo, o anche durante, il processo di accoppiamento. La femmina di una specie europea di orb weaver morde l’addome del maschio e lo trattiene durante l’accoppiamento. Anche se alcune femmine mangiano il maschio dopo l’accoppiamento, questa pratica non è comune. Il maschio della vedova nera (genere Latrodectus), per esempio, di solito muore giorni dopo l’accoppiamento, anche se occasionalmente è così debole dopo l’accoppiamento che viene catturato e mangiato dalla femmina. I ragni maschi di Nephilengys malabarensis del sud-est asiatico e della regione del Pacifico sud-occidentale si pensa che sfuggano al cannibalismo sessuale attraverso la copulazione a distanza, in cui l’organo copulatore del maschio si stacca durante l’accoppiamento e rimane nella femmina, permettendo il trasferimento prolungato dello sperma. Le femmine di alcune specie si accoppiano solo una volta, mentre altre si accoppiano più volte con lo stesso maschio o si accoppiano con diversi maschi. Le femmine longeve dei ragni miogalomorfi devono accoppiarsi ripetutamente perché perdono la pelle una o due volte all’anno, compreso il rivestimento delle spermateche.