Confuso?
- La formaldeide è CH2O, la più semplice aldeide.
- Formalina è il nome della soluzione satura (37%) di formaldeide. Così, un protocollo che richiede il 10% di formalina è approssimativamente equivalente al 4% di formaldeide. Attenzione però, alcune soluzioni contengono metanolo per fermare la polimerizzazione, ma questo potrebbe avere un effetto negativo sul vostro campione.
- Paraformaldeide (PFA) è in realtà formaldeide polimerizzata. La formaldeide “pura”, senza metanolo, può essere fatta riscaldando il PFA solido. Questa potrebbe essere chiamata paraformaldeide, ma in realtà non lo è perché non è la forma polimerica. Puoi comprare formaldeide di grado EM o puoi fare la tua…
Facendo la soluzione di paraformaldeide
La paraformaldeide al 4% è di solito fatta in PBS o TBS a 70 °C con alcune gocce di 5N NaOH per aiutare a chiarire la soluzione. Preparare la soluzione di paraformaldeide al 4% in una cappa chimica se non si vuole essere leggermente fissati da soli.
Spesso le scorte di PFA hanno impurità insolubili ed è meglio che queste vengano rimosse tramite una rapida rotazione in una centrifuga da tavolo o passando la soluzione preparata attraverso una siringa filtro. È anche importante rendersi conto che l’efficacia e il contenuto di impurità del PFA in polvere possono variare notevolmente da numero di lotto a numero di lotto del reagente. Non sorprenderti se le tue condizioni di concentrazione di fissazione & possono aver bisogno di essere ritoccate quando apri una nuova bottiglia di PFA.
Puoi conservare la soluzione, ma tutte le soluzioni vanno a male con il tempo quindi usare soluzioni appena preparate che sono incolori è spesso meglio. (Conservare le aliquote a -20 °C e usarle per un paio di mesi è tipico).
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