Confused?
- Formaldeído é CH2O, o mais simples aldeído.
- Formalina é o nome da solução saturada (37%) de formaldeído. Assim, um protocolo de chamada para 10% de formalina é aproximadamente equivalente a 4% de formaldeído. Cuidado, porém, que algumas soluções têm metanol para parar a polimerização, mas isto pode ter um efeito negativo na sua amostra.
- O formaldeído (PFA) é na verdade formaldeído polimerizado. O formaldeído “puro”, sem metanol, pode ser feito aquecendo o PFA sólido. Isto pode ser chamado de paraformaldeído, mas na verdade não é porque não é a forma do polímero. Você pode comprar formaldeído de grau EM ou pode fazer o seu próprio . . .
Fazer Paraformaldeído Solução
4% paraformaldeído é normalmente feito em PBS ou TBS a 70 °C com várias gotas de NaOH 5N para ajudar a esclarecer a solução. Prepare 4% de solução de paraformaldeído em uma capota química se você mesmo não quiser ser ligeiramente fixado.
As reservas de PFA têm impurezas insolúveis e é melhor que estas sejam removidas através de uma centrifugação rápida em uma centrífuga de mesa ou passando a solução preparada através de uma seringa de filtro. É também importante perceber que a eficácia e o teor de impurezas do PFA em pó pode variar muito de número de lote para número de lote de reagente. Não se surpreenda se as suas concentrações de fixação & condições podem precisar de ser buzinadas quando abrir um novo frasco de PFA.
Você pode armazenar a solução, mas todas as soluções vão mal com o tempo, por isso usar soluções recém preparadas que são incolores é muitas vezes melhor. (Armazenar aliquotas a -20 °C e usá-las durante um par de meses é típico).
