În majoritatea grupurilor, după ce un mascul s-a apropiat cu succes de o femelă și a montat-o, își introduce pedipalpul stâng în orificiul stâng al structurii genitale a femelei, iar pedipalpul drept în orificiul drept. La unii păianjeni primitivi (de exemplu, haplogynes, mygalomorfi) și la câțiva alții, masculul introduce ambele pedipalpe simultan în fanta genitală a femelei.
Structura genitală a femelei, sau epigynum, este o placă întărită pe partea inferioară a abdomenului, în fața gonoporului. După ce spermatozoizii sunt transferați în epigynum, aceștia se deplasează în receptacole (spermahecae) care se conectează la oviduct. Ouăle sunt fecundate pe măsură ce trec prin oviducturi și ies prin gonopor.
Forța care determină injectarea spermatozoizilor din pedipalpul masculului în receptaculul femelei nu a fost stabilită cu certitudine, dar poate implica creșterea presiunii sanguine care extinde țesutul vascular moale (hematodocha) dintre plăcile dure ale pedipalpilor. Acest lucru face ca o structură bulboasă care conține un canal să se răsucească și să se agațe în epigynum-ul femelei și să injecteze spermatozoizii ca și cum ar fi stoarse dintr-o seringă cu bulb.
Împerecherea poate necesita doar câteva secunde la unele specii, dar ore la altele. Unii masculi își reîncarcă pedipalpii și se împerechează din nou cu aceeași femelă. După împerechere, masculii din unele specii își ung epigynul cu o secreție, numită dop epiginal, care împiedică femela să se împerecheze a doua oară. De obicei, păianjenii masculi mor la scurt timp după, sau chiar în timpul procesului de împerechere. Femela unei specii europene de țesătoare de globuri mușcă din abdomenul masculului și se menține în timpul împerecherii. Deși unele femele mănâncă masculul după împerechere, această practică nu este obișnuită. Masculul văduvei negre (genul Latrodectus), de exemplu, moare de obicei la câteva zile după împerechere, deși ocazional este atât de slăbit după împerechere încât este capturat și mâncat de femelă. Se crede că păianjenii masculi Nephilengys malabarensis din Asia de sud-est și din regiunea Pacificului de sud-vest scapă de canibalismul sexual prin copulația la distanță, în care organul copulator al masculului se detașează în timpul împerecherii și rămâne în femelă, permițând un transfer prelungit de spermă. Femelele din unele specii se împerechează o singură dată, în timp ce altele se împerechează de mai multe ori cu același mascul sau se împerechează cu mai mulți masculi diferiți. Femelele longevive ale păianjenilor migalomorfi trebuie să se împerecheze în mod repetat, deoarece își pierd pielea o dată sau de două ori pe an, inclusiv căptușeala spermatecii.
.