Färgförändringar

Hypokromasier

Hypokromasier indikerar att de röda blodkropparna har mindre hemoglobin än normalt och termen hypokromasier används i två sammanhang:

1. Som en beskrivning av röda blodkroppar på ett blodutstryk: Här avser det utseendet på röda blodkroppar med en tunn kant av cytoplasma (på grund av mindre hemoglobin) vilket resulterar i ökad central blekhet.
2. För att beteckna en genomsnittlig korpuskulär hemaglobinkoncentration (MCHC) under referensintervallet. Hypokromasi eller hypokroma röda blodkroppar i denna mening korrelerar inte nödvändigtvis med förekomsten av tunnare hemoglobinränder (ökad central blekhet) i ett utstryk. Vid utvecklande järnbristanemi föregår uppkomsten av hypokromasier i utstryk ett subnormalt MCHC.

Hypokromasier orsakas av två huvudmekanismer:

• Defekt hemoglobinproduktion:
  

  Utveckling av järnbristanemi

  • Ärftlig defekt: Ärftliga defekter i hemoglobinproduktionen beror på genetiska mutationer som resulterar i en onormal produktion av glob i (aminosyra) kedjor. Detta förekommer hos människor och kallas thalassemier (α-thalassemi med defekter i α-kedjan av hemoglobin och β-thalassemi med defekter i β-kedjan av hemoglobin), men har inte beskrivits hos djur. Intressant nog resulterar porfyrier (ärftliga defekter i syntesen av protoporfyrinringen i hemoglobin) inte i hypokrom anemi hos drabbade djur.
  • Järnbrist: Eftersom järn är en viktig komponent i hemgruppen (porfyrinring + järn) leder järnbrist till minskad hemoglobinproduktion. Järnbrist orsakas oftast av kronisk extern blodförlust från mag-tarmkanalen, där långsam intermittent blödning (som inte lätt observeras av ägaren) tömmer järndepåerna, vilket begränsar erytropoesen och resulterar i produktion av röda blodkroppar som har mindre hemoglobin och är mindre än normalt (den ”korrekta” hemoglobinhalten är en signal till en röd blodkropp om att sluta dela sig. När hemoglobinet inte räcker till fortsätter den röda blodkroppen att dela sig, varvid varje delning leder till successivt mindre celler). När detta är långt framskridet resulterar det i en järnbristanemi, där de röda blodkropparna är mikrocytiska (låg genomsnittlig cellvolym) och hypokroma (låg MCHC) och är tydligt hypokroma i ett blodutstryk. Järnbristanemi förekommer lättare hos unga djur som har låga järndepåer (mjölken är järnfattig, nyfödda djur får inte järn genom moderkakan och de växer snabbt), så varje källa till blodförlust (t.ex. svårt loppangrepp) kan leda till järnbrist. Järnbristanemi kan också bero på näringsmässig järnbrist (eller kopparbrist, se nedan), men detta är sällsynt hos domesticerade djur som äter kommersiellt foder för sällskapsdjur eller köttfoder (som innehåller mycket järn). Unga smågrisar drabbades tidigare ofta av järnbristanemi eftersom de inte kunde få tillgång till järn i jorden (när de hölls intensivt). Detta åtgärdas genom att ge dem intramuskulära järninjektioner.
  • Kopparbrist: Koppar behövs för att utnyttja järn. Koppar är en viktig kofaktor för de enzymer som gör det möjligt att frigöra järn från lager hos makrofager och ta upp järn från mag-tarmkanalen. Kopparbrist kan yttra sig som en järnbristanemi. Även om kopparnivåerna i plasma/serum kan mätas (se relaterade länkar nedan), kräver diagnosen av kopparbrist mätning av kopparlagren i levern, eftersom kopparnivåerna i plasma inte alltid korrelerar med kroppens totala lager. Vi har sett mikrocytisk hypokrom anemi hos Musk Ox på grund av kopparbrist i kosten. Hos idisslare kan koppar vara bristfällig i fodret eller så kan överskott av zink eller molybden försämra absorptionen eller tillgängligheten av koppar, vilket resulterar i en sekundär kopparbrist.
  • Andra brister: Pyridoxal eller vitamin B6 är en viktig kofaktor för enzymet δ-aminolevulinsyradehydrogenas (ALAD), som katalyserar det första steget i hemsyntesvägen, dvs. omvandlingen av δ-aminolevulinsyra till porphobilinogen. Brist på vitamin B6 kan leda till mikrocytisk anemi hos grisar, men anemin är vanligtvis inte hypokrom.
• Hämning av hemoglobinproduktionen: Hämning av hemsyntesen kan resultera i järnbristanemi, särskilt om hämmningen är kronisk. Den vanligaste orsaken till hämning av hemsyntesen är blyförgiftning. Bly binder till sulfhydrylgrupper i enzymer och hämmar aktiviteten hos följande enzymer som är involverade i hemsyntesen: ALAD och ferrochetolas (som katalyserar bildandet av hem genom att förena järngruppen med protoporfyrin IX). Eftersom järn inte används för hemsyntesen ackumuleras det i de röda blodkroppar som utvecklas och bildar siderocyter. Vid kronisk blyförgiftning kan en ”relativ” järnbrist uppstå (relativ eftersom järnet finns i kroppen, men inte kan användas), vilket leder till mikrocytisk hypokrom anemi. Klassisk blyförgiftning resulterar dock vanligen i en normocytär normokrom anemi.

För alla praktiska ändamål uppträder sann hypokromasi hos vanliga husdjursarter endast i samband med avancerad järnbristanemi.

Det känns oftast igen hos hundar och kameldjur. Hos båda arterna tillskrivs järnbristen kronisk gastrointestinal blödning. Hos hund är blödning från vaskulär ektasi i kolon och blödande sår (t.ex. behandling med kortikosteroider eller icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel eller gastrointestinala tumörer vanliga orsaker till järnbristanemi. Hos kameldjur har järnbristanemi tillskrivits gastrointestinal blodförlust i samband med den blodsugande strongyleparasiten Haemonchus contortus (”barber’s pole”-mask). Hypokromasier vid avancerad järnbrist åtföljs av avvikelser i erytrocyternas form som tyder på fragmentering (schistocyter, keratocyter, acanthocyter) hos hunden. Detta kan bero på minskad deformbarhet hos cellerna med järnbrist, eftersom de tros vara styvare än normalt (mekaniskt bräckliga). Hos kameldjur är fusiforma (acuminocyter) och tårformade (dacryocyter) röda blodkroppar vanliga samtidiga fynd vid järnbristanemi (se bild ovan), men mekanismen för bildandet av dessa poikilocyter är okänd.

Hypokroma röda blodkroppar måste särskiljas från torocyter, en artefaktuell förändring av röda blodkroppar som efterliknar hypokromasi. Torocyter har ingen diagnostisk relevans, annat än att de kan felidentifieras som hypokroma röda blodkroppar, vilket leder till en felaktig diagnos av järnbrist.

Polykromasi

Polykromasi är ett kännetecken för omogna anukleära erytrocyter (som också är aggregerade retikulocyter) i blodet. De omogna röda blodkropparna är blå eftersom de innehåller måttliga till stora mängder RNA (ribosomer, polyribosomer) som uppväger hemoglobinets röda färg och ger cellerna en lila färg. Hos många arter stannar cellen, när den väl nått retikulocytstadiet, i benmärgen i ungefär två dagar och släpps sedan ut för att slutföra sin mognad genom att förlora sitt RNA och en del av sitt ytmembran medan den cirkulerar. Detta sker vanligtvis i mjälten. Följaktligen ses ett lågt antal polykromatofiler hos friska hundar (< 1,5 % retikulocyter). Omogna nukleära röda blodkroppar med RNA frigörs inte från märgen hos normala hästar och idisslare. Hos alla arter utom häst är graden av polykromasi i ett blodutstryk en bra vägledning om huruvida benmärgen reagerar (genom att frigöra omogna anukleära RBC) på en anemi, dvs. anemin är regenerativ om det finns tillräckligt många polykromatofiler närvarande. Hästen (och andra hästdjur) är ett undantag eftersom de vanligtvis inte frisätter polychromatofiler som svar på en anemi (de frisätter celler som är större än normalt, så kallade makrocyter). Hos hundar och katter kan antalet retikulocyter kvantifieras som en procentandel eller ett absolut antal.

Det råder ofta förvirring om innebörden av termerna, retikulocyter och polykromatofiler (polykromatofila RBC).

Retikulocyter

Retikulocyter är omogna anukleära erytrocyter som innehåller RNA och som färgar blått med den icke-metylenblått (NMB) eller fluorescerar med färgämnen som binder till RNA (t.ex.t.ex. oxazin). När de innehåller måttliga eller stora mängder RNA kallas de aggregerade retikulocyter och färgar lila i en Wrights- eller Diff-snabbfärgning, men om de bara innehåller lite RNA kallas de punktformiga retikulocyter, de färgar inte lila utan är röda. Det finns alltså alltid fler retikulocyter än polykromatofiler (polykromatofiler är endast aggregerade retikulocyter och inte punktformiga retikulocyter). Denna distinktion har betydelse hos katter, där endast aggregerade retikulocyter (eller polykromatofiler) räknas som en del av det regenerativa svaret.

Polykromatofiler