Förvirrad?
- Formaldehyd är CH2O, den enklaste aldehyden.
- Formalin är namnet på mättad (37 %) formaldehydlösning. Ett protokoll som kräver 10 % formalin motsvarar alltså ungefär 4 % formaldehyd. Var dock uppmärksam på att vissa lösningar innehåller metanol för att stoppa polymeriseringen, men detta kan ha en negativ effekt på ditt prov.
- Paraformaldehyd (PFA) är faktiskt polymeriserad formaldehyd. ”Ren”, metanolfri formaldehyd kan framställas genom att värma fast PFA. Detta kan kallas paraformaldehyd, men det är det faktiskt inte eftersom det inte är polymerformen. Du kan köpa formaldehyd av EM-kvalitet eller så kan du göra din egen … .
Förberedelse av paraformaldehydlösning
4% paraformaldehyd görs vanligen i PBS eller TBS vid 70 °C med några droppar 5N NaOH för att hjälpa till att förtydliga lösningen. Bered 4 % paraformaldehydlösning i en kemisk kåpa om du inte vill bli lätt fixerad själv.
Ofta har PFA-lager olösliga föroreningar och det är bäst att dessa avlägsnas via en snabb snurrning i en bordcentrifug eller genom att passera den beredda lösningen genom en filterspruta. Det är också viktigt att inse att effektiviteten och föroreningsinnehållet i pulveriserad PFA kan variera kraftigt från partinummer till partinummer av reagenset. Bli inte förvånad om dina fixeringskoncentrationer & villkor kan behöva justeras när du öppnar en ny flaska PFA.
Du kan lagra lösningen men alla lösningar blir dåliga med tiden så att använda nyberedda lösningar som är färglösa är ofta bäst. (Att förvara alikvotes vid -20 °C och använda dem under ett par månader är typiskt.).
