I de flesta grupper, efter att en hane har lyckats närma sig en hona och bestigit henne, för han in sin vänstra pedipalp i den vänstra öppningen av hennes genitalier och den högra pedipalp i den högra öppningen. Hos vissa primitiva spindlar (t.ex. haplogyner, mygalomorfer) och några få andra för hanen in båda pedipalparna samtidigt i honans genitalspalt.
Honans genitalstruktur, eller epigynum, är en härdad platta på undersidan av buken framför gonoporen. Efter att spermierna har överförts till epigynum rör de sig till behållare (spermathecae) som ansluter till äggledarna. Ägg befruktas när de passerar genom äggledarna och ut genom gonoporerna.
Den kraft som orsakar injektionen av spermier från hanens pedipalp till honans receptakel har inte fastställts med säkerhet, men det kan röra sig om ett ökat blodtryck som expanderar den mjuka vaskulära vävnaden (hematodocha) mellan de hårda plattorna på pedipalparna. Detta får en bulbformad struktur som innehåller en kanal att vrida sig och kroka in i honans epigynum och injicera spermierna som om de pressades ur en bulbspruta.
Parningen kan ta bara några sekunder hos vissa arter men timmar hos andra. Vissa hanar laddar upp sina pedipalpar och parar sig igen med samma hona. Efter parningen smetar hanarna hos vissa arter ut ett sekret över epigynum, en så kallad epigynalpropp, som hindrar honan från att para sig en andra gång. Spindelhannar dör vanligtvis strax efter, eller till och med under, parningsprocessen. Honan hos en europeisk art av klotspindlar biter sig fast i hanens buk och håller fast under parningen. Även om vissa honor äter upp hannen efter parningen är detta inte vanligt. Hanen hos den svarta änkan (släktet Latrodectus), till exempel, dör vanligtvis flera dagar efter parningen, även om han ibland är så svag efter parningen att han fångas och äts upp av honan. Manliga Nephilengys malabarensis-spindlar i Sydostasien och sydvästra Stillahavsregionen tros kunna undkomma sexuell kannibalism genom fjärrkopulation, där hanens kopulationsorgan lossnar under parningen och stannar kvar i honan, vilket möjliggör långvarig spermaöverföring. Honorna hos vissa arter parar sig bara en gång, medan andra parar sig flera gånger med samma hane eller parar sig med flera olika hanar. De långlivade honorna hos mygalomorfa spindlar måste para sig upprepade gånger eftersom de tappar sin hud en eller två gånger om året, inklusive slemhinnan på spermathecaten.
