Esittely
Kuvan putket on pidetty vinossa, jotta voidaan osoittaa kanin plasman koagulaatio sen jälkeen, kun sitrattua kanin plasmaa on inkuboitu Staphylococcus aureus – (ylempi putki) tai Staphylococcus epidermidis -viljelmien (alempi putki) kanssa. Huomaa hieman samea geelimäinen hyytymä ylimmässä putkessa, joka sisältää koagulaasipositiivisen organismin. Koagulaasinegatiivista organismia sisältävän alimman putken plasma ei pysy lähellä putken pohjaa, kun sitä pidetään vinossa.
Menetelmät
S. aureuksen ja S. epidermidiksen bakteeriviljelmiä inkuboitiin 37oC:n lämpötilassa 16 tuntia tryptisessä soijaliemessä. Kymmenes millilitra kutakin viljelmää laitettiin lasiputkeen, joka sisälsi 0,4 ml sitratoitua kaniplasmaa (Lampmire Biological Laboratories). Molempia putkia, joista toinen sisälsi S. aureusta ja toinen S. epidermidistä, inkuboitiin 37oC:n vesihauteessa 24 tuntia. Koagulaasipositiivinen organismi, S. aureus, aiheutti plasman hyytymisen putkeen (ks. kuvan ylin putki), kun taas koagulaasinegatiivinen organismi, S. epidermidis, ei aiheuttanut hyytymistä (ks. kuvan alin putki). Useimmat S. aureus -kannat tuottavat kahdenlaista koagulaasia, sidottua koagulaasia, jota kutsutaan myös hyytymistekijäksi, ja vapaata koagulaasia. Sidottu koagulaasi on kiinnittynyt bakteerin soluseinään ja voi entsymaattisesti muuntaa plasman fibrinogeenin liukenemattomaksi fibriiniksi ja aiheuttaa bakteerisolujen paakkuuntumisen. Tässä testissä bakteerien paakkuuntumista ei havaita. Tämä testi mittaa paremmin organismin kykyä tuottaa solunulkoista tai vapaata koagulaasia. Vapaa koagulaasi reagoi globuliiniplasmatekijän (koagulaasireagoiva tekijä) kanssa muodostaen stafylotrombiinia. Stafylotrombiini katalysoi sitten fibrinogeenin hajoamista liukenemattomaksi fibriiniksi. Liukenematon fibriini muodostaa sitten hyytymän, joka näkyy kuvan ylimmässä putkessa. Putkia pidettiin vinossa ja kuva otettiin Olympus C-3040 3,3 megapikselin digitaalikameralla.
Keskustelu
S. aureus on yleinen ihon (impetigo, paiseet, karbunkkelit ja follikuliitti), pehmytkudosten (selluliitti), luun (osteomyeliitti) ja nivelten (septinen niveltulehdus) infektioiden aiheuttaja. Tämä Staphylococcus-laji voi myös aiheuttaa useita toksiinivälitteisiä sairauksia ihmisillä, kuten ruokamyrkytyksen, kuumennetun ihon oireyhtymän ja toksisen sokin oireyhtymän. On olemassa useita muita stafylokokkilajeja, jotka kolonisoivat ihmistä. Nämä stafylokokkilajit liittyvät harvemmin ihmisten sairauksiin, mutta ne ovat usein kontaminantteja iho- ja pehmytkudosvaurioista otetuissa näytteissä. Koagulaasitesti on yksi tapa erottaa erittäin patogeeninen S. aureus muista vähemmän patogeenisistä stafylokokkilajeista ihmiskehossa. S. aureus on koagulaasipositiivinen organismi, kun taas kaikki muut ihmistä kolonisoivat stafylokokkilajit ovat koagulaasinegatiivisia
1. Berke, A. ja R. C. Tilton. 1986. Nopeiden koagulaasimenetelmien arviointi Staphylococcus aureuksen tunnistamiseksi. J Clin. Microbiol. 23:916-919.
2. Kloos, W. E. ja K. H. Schleifer. 1975. Yksinkertaistettu järjestelmä ihmisen Staphylococcus-lajien rutiininomaista tunnistamista varten. J. Clin. Microbiol. 1:82-88.
3. Murray, P. R., K. S. Rosenthal ja M. A. Pfaller. 2009. Staphylococcus and related gram-positive cocci, s. 211-214. Teoksessa P. R. Murray, K. S. Rosenthal ja M. A. Pfaller (toim.), Medical microbiology, 6th ed. Mosby Elsevier Publishers, Philadelphia, PA.
4. Yrios, J. W. 1977. Kanin ja sian plasman vertailu putkikoagulaasitestissä. J. Clin. Microbiol. 5 :221-224.
