Värimuutokset

Hypokromasia

Hypokromasia tarkoittaa, että punasoluissa on normaalia vähemmän hemoglobiinia, ja termiä hypokromasia käytetään kahdessa yhteydessä:

1. Punasolujen kuvaajana verikokeessa: Tässä tarkoitetaan punasoluja, joissa on ohut sytoplasmavyöhyke (johtuen hemoglobiinin vähenemisestä), mikä johtaa lisääntyneeseen keskeiseen kalpeuteen.
2. Merkitsemään vertailuväliä alempana olevaa keskimääräistä korpuskulaarista hemaglobiinipitoisuutta (MCHC). Hypokromaattisuus tai hypokromaattiset punasoluindeksit tässä merkityksessä eivät välttämättä korreloi ohuempien hemoglobiinivanteiden (lisääntynyt keskeinen kalpeus) esiintymisen kanssa preparaatissa. Kehittyvässä raudanpuuteanemiassa hypokromasian ilmaantuminen preparaateissa edeltää epänormaalia MCHC:tä.

Hypokromasia johtuu kahdesta päämekanismista:

• Viallinen hemoglobiinituotanto:
  

  Raudanpuuteanemian kehittyminen

  • Perinnöllinen vika: Perinnölliset viat hemoglobiinituotannossa johtuvat geneettisistä mutaatioista, jotka johtavat globin epänormaaliin tuotantoon (aminohappo)ketjuissa. Tätä esiintyy ihmisillä ja niitä kutsutaan talassemioiksi (α-talassemia, jossa on hemoglobiinin α-ketjun vikoja ja β-talassemia, jossa on hemoglobiinin β-ketjun vikoja), mutta niitä ei ole kuvattu eläimillä. Mielenkiintoista on, että porfyriat (perinnölliset viat hemoglobiinin protoporfyriinirenkaan synteesissä) eivät johda hypokromaattiseen anemiaan kyseisillä eläimillä.
  • Raudanpuute: Koska rauta on hemiryhmän (porfyriinirengas + rauta) välttämätön komponentti, raudanpuute johtaa hemoglobiinin tuotannon vähenemiseen. Raudanpuute johtuu yleisimmin kroonisesta ulkoisesta verenhukasta ruoansulatuskanavasta, jossa hidas ajoittainen verenvuoto (jota omistaja ei helposti havaitse) tyhjentää rautavarastot, mikä rajoittaa erytropoieesia ja johtaa sellaisten punasolujen tuotantoon, joissa on vähemmän hemoglobiinia ja jotka ovat normaalia pienempiä (”oikea” hemoglobiinipitoisuus on signaali punasolulle, että sen on pysähdyttävä jakaantumasta; kun hemoglobiini on riittämätön, punasolu jatkaa jakautumistaan, ja jokaisesta jakaantumiskerrasta syntyy peräkkäin pienempiä soluja). Pitkälle edenneenä tämä johtaa raudanpuuteanemiaan, jossa punasolut ovat mikrosyyttisiä (pieni keskimääräinen solutilavuus) ja hypokromisia (matala MCHC), ja ne ovat selvästi hypokromisia verikokeessa. Raudanpuutosanemioita esiintyy helpommin nuorilla eläimillä, joiden rautavarastot ovat pienet (maidossa on vähän rautaa, vastasyntyneet eivät saa rautaa istukan kautta ja ne kasvavat nopeasti), joten mikä tahansa verenhukan lähde (esim. vakava kirpputartunta) voi johtaa raudanpuutokseen. Raudanpuuteanemia voi johtua myös ravinnosta johtuvasta raudanpuutteesta (tai kuparin puutteesta, ks. jäljempänä), mutta tämä on harvinaista kotieläimillä, jotka saavat kaupallista lemmikkieläinten ruokaa tai liharuokavaliota (joka sisältää runsaasti rautaa). Nuoret porsaat kärsivät ennen usein raudanpuuteanemiasta, koska ne eivät saaneet rautaa maaperästä (kun niitä pidettiin intensiivisesti). Tämä ongelma on ratkaistu antamalla niille lihaksensisäisiä rautainjektioita.
  • Kuparin puute: Kuparia tarvitaan raudan hyödyntämiseen. Kupari on välttämätön kofaktori entsyymeille, jotka mahdollistavat raudan vapautumisen varastoista makrofageilla ja raudan ottamisen ruoansulatuskanavasta. Kuparin puute voi ilmetä raudanpuuteanemiana. Vaikka plasman/seerumin kuparipitoisuudet voidaan mitata (ks. jäljempänä olevat linkit), kuparin puutteen diagnoosi edellyttää maksan kuparivarastojen mittaamista, koska plasman kuparipitoisuudet eivät aina korreloi kehon kokonaisvarastojen kanssa. Olemme nähneet Musk Oxilla mikrosyyttistä hypokromaattista anemiaa, joka johtuu ravinnon aiheuttamasta kuparin puutteesta. Märehtijöillä kupari voi olla puutteellista ruokavaliossa, tai sinkin tai molybdeenin ylijäämä voi heikentää kuparin imeytymistä tai saatavuutta, mikä johtaa sekundaariseen kuparin puutteeseen.
  • Muut puutokset: Pyridoksaali eli B6-vitamiini on välttämätön kofaktori entsyymille δ-aminolevuliinihappodehydrogenaasi (ALAD), joka katalysoi hemisynteesireitin ensimmäistä vaihetta eli δ-aminolevuliinihapon muuttamista porfobilinogeeniksi. B6-vitamiinin puutokset voivat johtaa mikrosyyttiseen anemiaan sioilla, mutta anemia ei tyypillisesti ole hypokrominen.
• Hemoglobiinin tuotannon estyminen: Hemosynteesin estäminen voi johtaa raudanpuuteanemiaan, erityisesti jos esto on krooninen. Yleisin syy hemisynteesin estoon on lyijymyrkytys. Lyijy sitoutuu entsyymien sulfhydryyliryhmiin ja estää seuraavien hemisynteesiin osallistuvien entsyymien toimintaa: ALAD ja ferroketolaasi (joka katalysoi hemin muodostumista liittämällä rautaryhmän protoporfyriini IX:ään). Koska rautaa ei käytetä hemisynteesiin, se kerääntyy kehittyviin punasoluihin muodostaen siderosyyttejä. Kroonisessa lyijymyrkytyksessä voi syntyä ”suhteellinen” raudanpuute (suhteellinen, koska rauta on elimistössä, sitä ei vain voida käyttää), mikä johtaa mikrosyyttiseen hypokromaattiseen anemiaan. Klassinen lyijymyrkytys johtaa kuitenkin yleensä normosyyttiseen normokromaattiseen anemiaan.

Käytännössä todellista hypokromaasiaa esiintyy tavallisilla kotieläinlajeilla vain pitkälle edenneen raudanpuuteanemian yhteydessä.

Se tunnistetaan yleisimmin koirilla ja kamelieläimillä. Molemmilla lajeilla raudanpuute johtuu kroonisesta ruoansulatuskanavan verenvuodosta. Koiralla paksusuolen verisuonten ektasiasta johtuva verenvuoto ja vuotavat haavaumat (esim. kortikosteroidi- tai ei-steroidisten tulehduskipulääkkeiden hoito tai ruoansulatuskanavan kasvaimet ovat yleisiä raudanpuuteanemian syitä. Kameleilla raudanpuuteanemian on katsottu johtuvan verta imevän Haemonchus contortus -loisen (”parturimato”) aiheuttamasta ruoansulatuskanavan verenhukasta. Pitkälle edenneessä raudanpuutteessa esiintyvään hypokromaasiaan liittyy koiralla pirstoutumiseen viittaavia erytrosyyttien muotopoikkeavuuksia (skistosyytit, keratosyytit, akantosyytit). Tämä saattaa johtua raudanpuutteisten solujen heikentyneestä muodonmuutoskyvystä, koska niiden ajatellaan olevan normaalia jäykempiä (mekaanisesti hauraita). Kamelieläimillä fuusionmuotoiset (akuminosyytit) ja kyynelpisaran muotoiset (dakryosyytit) punasolut ovat yleisiä samanaikaisia löydöksiä raudanpuuteanemiassa (ks. kuva yllä), mutta näiden poikilosyyttien muodostumismekanismia ei tunneta.

Hypokromaattiset punasolut on erotettava torosyyteistä, artefaktuaalisesta punasolumuutoksesta, joka jäljittelee hypokromasiaa. Torosyyteillä ei ole muuta diagnostista merkitystä kuin se, että ne saatetaan virheellisesti tunnistaa hypokromaattisiksi punasoluiksi, mikä johtaa raudanpuutteen virheelliseen diagnoosiin.

Polykromaasia

Polykromaasia on kypsymättömien anukleaatti-erytrosyyttien (jotka ovat myös aggregaattisia retikulosyyttejä) ominaisuus veressä. Epäkypsät punasolut ovat sinisiä, koska ne sisältävät kohtalaisia tai suuria määriä RNA:ta (ribosomeja, polyribosomeja), joka kumoaa hemoglobiinin punaisen värin ja antaa soluille violetin värin. Kun solu saavuttaa retikulosyyttivaiheen, se pysyy monilla lajeilla luuytimessä noin kaksi vuorokautta, minkä jälkeen se vapautuu saattamaan kypsymisensä päätökseen menettämällä RNA:nsa ja osan pintakalvostaan, kun se kiertää. Tämä tapahtuu yleensä pernassa. Näin ollen terveillä koirilla polykromatofiilien määrä on vähäinen (< 1,5 % retikulosyyteistä). Normaaleilla hevosilla ja märehtijöillä luuytimestä ei vapaudu epäkypsää ytimellistä RBC:tä, jossa on RNA:ta. Kaikilla lajeilla hevosta lukuun ottamatta polykromaattisuuden aste verinäytteessä on hyvä osoitus siitä, reagoiko luuydin (vapauttamalla epäkypsää anukleaattista RBC:tä) anemiaan, eli anemia on regeneratiivinen, jos polykromatofiilejä on riittävästi. Hevonen (ja muut hevoseläimet) on poikkeus, sillä ne eivät yleensä vapauta polykromatofiilejä vastauksena anemiaan (ne vapauttavat normaalia suurempia soluja, joita kutsutaan makrosyyteiksi). Koirilla ja kissoilla retikulosyyttien määrä voidaan määrittää prosentteina tai absoluuttisena lukumääränä.

Termien retikulosyytit ja polykromatofiilit (polykromatofiiliset punasolut) merkitys on usein epäselvä.

Retikulosyytit

Retikulosyytit ovat RNA:ta sisältäviä epäkypsiä anukleaattipohjaisia erytrosyyttejä, jotka värjäytyvät sinisiksi ei-metyleenisinisellä (NMB) värjäyksellä tai fluoresoivat RNA:han sitoutuvilla väriaineilla (esim.esim. oksatsiini). Kun ne sisältävät kohtalaisia tai suuria määriä RNA:ta, niitä kutsutaan aggregoiduiksi retikulosyyteiksi ja ne värjäytyvät purppuranpunaisiksi Wrightin tai Diff-quick-värjäyksessä, mutta jos ne sisältävät vain vähän RNA:ta, niitä kutsutaan pistemäisiksi retikulosyyteiksi, ne eivät värjäydy purppuranpunaisiksi ja ovat punaisia. Retikulosyyttejä on siis aina enemmän kuin polykromatofiilejä (polykromatofiilit ovat vain aggregoituneita retikulosyyttejä eivätkä pistemäisiä retikulosyyttejä). Tällä erottelulla on merkitystä kissoilla, joilla vain aggregoidut retikulosyytit (tai polykromatofiilit) lasketaan osaksi regeneratiivista vastetta.

Polykromatofiilit

Polykromatofiilit ovat retikulosyyttejä, jotka sisältävät riittävästi RNA:ta värjäytyäkseen siniviolettiväriseksi Wrightin värjäyksessä. Ne koostuvat kaikkein epäkypsimmistä retikulosyyteistä (eli aggregaattiretikulosyyteistä), koska ne sisältävät eniten RNA:ta. Kaikki polykromatofiilit ovat retikulosyyttejä, mutta kaikki retikulosyytit eivät kuitenkaan ole polykromatofiilejä Wrightin värjätyssä verikokeessa, kuten edellä mainittiin)

Retikulosyyttien arviointi auttaa määrittämään, onko aneemisella potilaalla terve luuydinreaktio anemiaan, mikä näkyisi lisääntyneenä lisääntyneenä määränä nuoria punasoluja, joita tuotetaan korvaamaan menetettyjä punasoluja. Retikulosyyttien määrän tulkinta vaihtelee lajeittain.

Haamupunasolut

Punasolujen haamut edustavat soluja, jotka ovat repeytyneet verenkierrossa ja menettäneet hemoglobiininsa. Jäljelle jääneet punasolukalvot näkyvät tällöin ”haamuina”. Haamupunasolut edustavat punasolujen lyysiä (hemolyysiä). Tämä voi olla todellinen in vivo -löydös tai in vitro -artefakti.

• In vitro -artefakti: Vähäisiä määriä haamupunasoluja voi näkyä missä tahansa preparaattikokeessa, jos solut ovat revenneet preparoinnin aikana. Lipemiset näytteet (esim. eläimet, joita ei ole paastotettu ennen näytteenottoa, tai eläimet, joilla on hyperlipidemiatila) ovat alttiimpia punasolujen lyysaukselle. Jos näytteet kerätään tai niitä käsitellään väärin (esim. pakastetaan), punasolut voivat lysoitua putkessa, jolloin syntyy paljon haamusoluja. Tämä on erotettava aidosta in vivo -hemolyysistä, jolla on patologista merkitystä. Tämä voidaan tehdä arvioimalla eläimestä intravaskulaarisen hemolyysin syy (ks. jäljempänä) tai dokumentoimalla hemoglobinuria (jonka pitäisi liittyä todelliseen intravaskulaariseen hemolyysiin). Repeytyneistä soluista peräisin oleva hemoglobiini (joko in vitro- tai in vivo -hemolyysi) on merkittävä häiriötekijä, joka vaikuttaa monien kliinisten patologisten testien tuloksiin ja sekoittaa tulkintaa.
• In vivo -verisuonensisäinen hemolyysi: Intravaskulaarisen hemolyysin syitä eläimillä on useita, kuten hapetusvaurio ja erytroparasiitit. Nämä voivat lyseroida punasoluja verenkierrossa, mikä johtaa hemoglobinemiaan ja hemoglobinuriaan. Koska hemoglobiini voi aiheuttaa vaurioita munuaistubuluksille (joko suoraa sytotoksisuutta tai sitomalla typpioksidia aiheuttaen hypoksiaan liittyvää tubulusnekroosia), hemoglobinemialla ja hemoglobinurialla on merkittäviä patologisia seurauksia, kuten akuutti munuaisten vajaatoiminta. Siksi on ratkaisevan tärkeää erottaa toisistaan artefaktinen (putkessa tapahtuva) hemolyysi ja todellinen in vivo -verisuonensisäinen hemolyysi. Tämä edellyttää potilaan arviointia (intravaskulaarisen hemolyysin syyn selvittämiseksi), näytteenoton (vaikea näytteenotto, jossa veri leikkautuu, voi hemolysoida punasoluja) ja käsittelyn (näytteiden toimittaminen keskellä talvea ilman suojaa kylmältä) tuntemusta sekä hemoglobinurian dokumentointia (on erotettava hematuriasta), jota esiintyy vain in vivo -hemolyysin yhteydessä. On huomattava, että joillakin eläimillä, joilla on akuutti intravaskulaarinen hemolyysi, voi olla normaali hematokriitti, joten anemian esiintymisen tai puuttumisen perusteella ei pitäisi erottaa todellista in vivo -hemolyysiä artefaktista. Intravaskulaarisen hemolyysin syitä ovat muun muassa:
  • 

    Haamusolut hevosella, jolla oli punaisen vaahteranlehden myrkyllisyydestä johtuva hapetusvaurio.

    Hapettimet: Sinkkipennut koirilla, sipulit koirilla ja kissoilla (sipulipohjainen vauvanruoka), naftaleenin koipallot (koirat), haisunäätä (koirat, pandat), punaiset vaahteranlehdet (hevoset), kuparimyrkytys (lampaat). Eksentrosyytit ja Heinzin kappaleet tukevat RBC:n hapetusvaurion olemassaoloa tässä tilanteessa. Heinzin kappaleet voidaan helposti tunnistaa haamu-RBC:stä.

  • Loiset: Babesia-lajit.
  • Bakteerit: Klostriditoksiinit, Leptospira.
  • Myrkyt: Käärmeiden myrkyt, mehiläisten pistot (mellitin).
  • Metaboliset tilat: Akuutti maksan vajaatoiminta (hevoset), hypofosfatemia (koirat, kissat, naudat)
  • Lääkkeet: DMSO, fenotiatsiinikastikkeet (hevoset), K-vitamiini (koirat), propofoli (koirat).

Linkkejä

• Cornellin yliopiston eläintautidiagnostiikkakeskuksen kliinisen patologian laboratorion tarjoamat testit raudan ja erytroparasiittien varalta (veren preparaattitutkimus), mukaan lukien raudan määrä, raudan kokonaissitomiskapasiteetti ja transferriinin prosentuaalinen kyllästyneisyysaste.