Confused?
- A formaldehid a CH2O, a legegyszerűbb aldehid.
- A formalin a telített (37%-os) formaldehidoldat neve. Így egy protokoll, amely 10%-os formalin alkalmazását írja elő, nagyjából 4%-os formaldehidnek felel meg. Vigyázzunk azonban, hogy egyes oldatok metanolt tartalmaznak a polimerizáció megállítására, de ez negatív hatással lehet a mintára.
- A paraformaldehid (PFA) valójában polimerizált formaldehid. “Tiszta”, metanolmentes formaldehidet a szilárd PFA hevítésével lehet előállítani. Ezt nevezhetnénk paraformaldehidnek, de valójában nem az, mert ez nem a polimer forma. Vásárolhatunk EM minőségű formaldehidet, vagy készíthetünk magunknak …
Paraformaldehid oldat készítése
4%-os paraformaldehidet általában PBS-ben vagy TBS-ben készítünk 70 °C-on, néhány csepp 5N NaOH-val az oldat tisztítása érdekében. Készítsen 4%-os paraformaldehid oldatot vegyszerelszívóban, ha nem szeretné, hogy kissé maga is fixálódjon.
A PFA-készletekben gyakran vannak oldhatatlan szennyeződések, és a legjobb, ha ezeket egy asztali centrifugában végzett gyors centrifugálással vagy az elkészített oldat szűrőfecskendőn való átvezetésével távolítja el. Azt is fontos tudatosítani, hogy a porított PFA hatékonysága és szennyeződéstartalma nagymértékben változhat a reagens tételszámától tételszámig. Ne lepődjön meg, ha a rögzítési koncentrációk & körülményeit esetleg módosítani kell, amikor egy új üveg PFA-t nyit ki.
Az oldatot tárolhatja, de minden oldat idővel megromlik, ezért gyakran a frissen készített, színtelen oldatok használata a legjobb. (Az aliquoták -20 °C-on történő tárolása és néhány hónapos felhasználása a jellemző).
