COX-1を越えて：アスピリンの血小板生物学への影響と化学予防の潜在的メカニズム

血小板は止血、血栓症、血管の完全性の維持に重要な役割を担っている． 血小板活性における不適切な調節は不適切な出血につながり、一方、過剰な活性は血栓症および急性虚血性イベントにつながる。 血栓形成プロセスは、膜表面の糖タンパク質と、アデノシン二リン酸（ADP）、トロンボキサンA2（TXA2）、セロトニン、コラーゲン、トロンビン、エピネフリンなどの外因性エフェクターの結合により、凝固カスケードを引き起こす受容体によって制御される。 血小板凝集の基本的な流れは、開始、伸展、安定の3段階である。 初期段階では、血小板はvWF（von Willebrand factor）/コラーゲン複合体に結合し、コラーゲンによってさらに活性化されるのに十分な時間、血管損傷と反応の場所にとどまる。 増幅は、分泌と凝集の第二波によって特徴づけられ、血小板を介したトロンビン、アデノシン二リン酸（ADP）、トロンボキサンA2（TXA2）の放出によってさらに増強される。 第2波はまた、新たに到着した血小板が最初の血小板単層に付着する伸展期を示す。 タンパク質受容体とエフェクターの相互作用の後、活性化された血小板は、表面の糖タンパク質、フィブリノーゲン、フィブリン、vWFと活性化された糖タンパク質の間に橋を形成して凝集を続ける。

血小板凝集におけるシグナル伝達は、コラーゲン、トロンビン、ADP、TXA2、エピネフリンなどのアゴニストによる血小板表面の受容体の活性化から始まる。 これらのGPCR受容体の活性化はホスホリパーゼA2の活性化につながり、ホスホチジルコリンや他の膜リン脂質を切断し、グリセロール骨格のC2位からアラキドン酸を遊離させる。 アラキドン酸は、炎症反応を媒介する様々なプロスタグランジン（PGD2、PGI2、PGE2、PGF2α、）に変換されうる。 さらに、TXA2などのトロンボキサンは、循環血小板の活性化を増幅するのに加え、血小板の放出、凝集、凝固を誘発する。 プロスタグランジンエンドペルオキシド合成酵素-1 (PGSH-1) / シクロオキシゲナーゼ-1 (COX-1) は、アラキドン酸を前駆代謝物のプロスタグランジンG2およびプロスタグランジンH2に変換する最初のシクロオキシダーゼ反応およびパーオキシダーゼ反応を行う。 これらは化学的に精製され、血小板由来の反応の大部分を媒介するTXA2などの他のプロスタグランジンを生成する。 血小板活性化の間に起こるシグナル伝達事象の要約を図3に示す。

Aspirin modulates platelet activity and biology- cyclooxygenase inhibition

Aspirin inhibits platelet aggregation and prostaglandin release . 酢酸カルボニル炭素に14Cを標識したアスピリンを用いた初期の研究では、<0.1%の14C放射標識が血小板に取り込まれ、その活性は主に3つのタンパク質と関連していることが示された。 この結合は不可逆的で共有結合の形成を示すが、生物学的に適切な濃度で飽和するのは85 kDaのタンパク質1つだけであることが分かった。 他の2つの可溶性血小板タンパク質は非飽和的なアセチル化を示したことから、血小板におけるアスピリン依存性のアセチル化は、特異的と非特異的の両方があることが示唆された。 アセチル化された85 kDaの酵素は、後にプロスタグランジンエンドペルオキシド合成酵素-1 (PTGS-1/COX-1) であることが判明した。 COX-1は、ほとんどの組織で恒常的に発現している二重機能性酵素であり、空間的に異なるが機構的には結合した活性部位で、2つの異なる連続した反応を行うことが分かっています。 COX-1は正常細胞では膜結合型であり，小胞体の内腔面や核膜の内外面に埋め込まれている． しかし、血小板は無核細胞であり、COX-1タンパク質は、血小板生合成時の分界膜系に由来する緻密なチューブ状膜系に発現している。 この密な管状膜系は、血小板の活性化に重要な役割を果たし、血小板におけるエイコサノイド合成の主要な部位である . 85 kDa の COX-1 ホモダイマーは 576 残基を持ち、様々なリジン側鎖でグリコシル化されている。 COX-1はその活性部位でアスピリン阻害に関連する数少ないタンパク質の一つであるが、リジン残基のグリコシル化は他の残基、この場合はCOX-1の活性部位のセリンのアセチル化を促進することが重要である . COX-1の構造サブユニットには、上皮成長因子ドメイン、膜結合ドメイン、触媒活性部位の3つの折り畳みドメインが組み込まれている。 触媒活性部位には、アラキドン酸を二酸化して水酸化エンドペルオキシドであるプロスタグランジンG2（PGG2）を生成するシクロオキシゲナーゼ部位と、PGG2をPGH2に還元するペルオキシダーゼ活性部位が隣接して存在している。 膜活性ドメインの反対側、触媒ドメイン内にはペルオキシダーゼ活性部位があり、浅い裂け目にヘム補酵素が結合している。 ヘム基は、アラキドン酸の脂質過酸化のためにシクロオキシゲナーゼ活性部位でチロシルラジカルを活性化するのに必須である。 ヘム結合ペルオキシダーゼ部位の反対側、膜結合ドメインに由来するトンネルの頂点に、シクロオキシゲナーゼ活性部位がある。 アラキドン酸がこの部位に結合すると、基質のカルボキシル基がジ・オキシゲノンのために再位置決めされる。 2-ブロモアセトキシ安息香酸で処理したヒツジCOX-1の構造研究は、活性部位のシクロオキシゲナーゼ末端へのアラキドン酸の結合、および結果としてアラキドン酸の二重酸素化が、セリン530アセチル化の結果として抑制されることを示唆している.

活性部位セリンのアセチル化によるアスピリンCOX-1の不可逆的阻害はプロスタグランジン生合成を劇的に減少させている.また、活性部位アセチル化によるアラキドン酸の結合、そして結果として活性部位セリンへのアラキドン酸の二重酸素化も、セリンにアセチルスルホキシドを付加することによって抑制される. 血小板ではCOX-1を速やかに再生することができず，その結果，COX-1活性は新たな血小板生合成によってのみ回復することができる． トロンボキサンA2、プロスタグランジンE2、プロスタサイクリン（PGI2）の合成は、アスピリン処理血小板で最も大きな影響を受け、凝固機構の欠損、胃粘膜の分泌低下、胃酸による刺激の増加、さらに病態生理学的凝固、血管の拡張・収縮が変化する。

COX-2 はアミノ酸レベルで COX-1 と60%同一で、その立体構造はほぼ重ね合わせて考えることができる。 COX-2は誘導性であり、血小板や上皮細胞でCOX-1によって合成されるのと同じプロスタグランジンによって発現が亢進される。 COX-2は巨核球増殖時に過剰発現し、慢性骨髄性白血病や真性多血症患者の骨髄断面像で同定されている 。 別の研究では、mRNAレベルを直接測定することによって、COX-1に対する血小板のCOX-2の発現レベルを特徴づけた。 その結果、血小板は、血小板COX-1よりも有意に低いレベルではあるが、いくつかの悪性上皮細胞と同レベルのCOX-2を発現していることが明らかになった。 内皮細胞および上皮細胞におけるCOX-2のアセチル化は、PGI2およびPGE2の生合成を阻害し、これらは炎症などの下流プロセスに対して異なる影響を与える。 アスピリンによるCOX-1およびCOX-2の阻害は、プロスタグランジン生合成阻害の異なるプロファイルをもたらすが、いずれの場合も阻害の基本は、プロスタグランジンエンドペルオキシド合成酵素の遮断とその結果としての多機能プロスタグランジンH2レベルの減少である。 COX-3の血小板生物学的な役割はまだ不明である。

アスピリンのCOX阻害活性は、投与量に依存する。 低用量（75～300mg）では、一般的な血小板拮抗薬であり血管拡張薬であるプロスタサイクリン（PGI2）を抑制することなく、血小板のTXA2産生を選択的に抑制する。 PGI2は主に血管のCOX-2に由来すると考えられ、低用量ではCOX-2の阻害は最小限であることが示唆された。 高用量（>1200mg）では、COX-1およびCOX-2の病態生理学的阻害に関連する特性である鎮痛および抗炎症の特性を有する。 COX-2はアラキドン酸を利用してリポキシン、特に15-ヒドロキシエイコサテトラエン酸（15-HETE）を合成することもできることに注目することが重要である。 この生合成経路はCOX-2がアセチル化されてもそのまま残ると予想される。 このようなCOX活性の阻害の差は、アスピリンの相対的な阻害力によって、一部説明することができる。 アスピリンは一般的に非特異的なCOX阻害剤と考えられているが、COX-1とCOX-2に対して高い選択性を持っている。 Blancoらに見られるように、COX-1に対するアスピリンのIC50は約3.5μMであり、COX-2に対するIC50は約30μMである。 両酵素のアスピリン反応活性部位は相同であるが、COX-2のSer-516のアセチル化により、触媒活性は部分的にしか阻害されない。 低用量域で達成可能な血清濃度（〜7μM）を考えると、COX-2が5％以上アセチル化されていることは考えにくく、一方、血小板由来のCOX-1は4563>70％アセチル化されている可能性が高いと考えられる。 このことから、通常の低用量アスピリンは、循環血小板のCOX-1阻害を常に維持し、末梢のCOX-2阻害にはほとんど影響を及ぼさないことが示唆される。 血中および組織中のCOX活性に対する低用量および高用量アスピリンの効果の概要を表1に示す。

Aspirin-dependent acetylation of platelet-interacting proteins in blood

Platelets express a variety of surface receptors that allows they interact with plasma and blood proteins, pathogen, pathogen-related products, and the inflamed endothelium. 表面受容体は、傷ついた血管系への血小板の接着、凝固血栓の形成、および多くの代謝エフェクターを介した活性化に不可欠である。 血小板と全身循環中の他の血液タンパク質との相互作用は、凝固反応の実行と解決に重要である。 興味深いことに、これらのタンパク質の多くもまた、アスピリンによって修飾されます。

フィブリノーゲン

Farr と共同研究者は、1968 年に、アスピリン アセチル化の標的としてフィブリノーゲンを同定しました。 フィブリノゲンは、血漿中の可溶性タンパク質として、また、血小板中の細胞膜結合タンパク質として見つかっています。 フィブリノーゲンは、血小板タンパク質全体の3-10%を占め（25%近くはα顆粒に存在）、血小板の活性化により放出されます。 フィブリノーゲンは、in vitro および in vivo でアスピリンによりアセチル化され、ε-N-アセチルリジン誘導体を形成し、平均3残基が修飾されることが報告されています。 アセチル化されたフィブリノーゲンはフィブリン凝固の溶解を促進する。

Albumin

アスピリンのアセチル化によるアルブミン修飾は半世紀以上前から知られていた。 Farrらの多くの研究は、アルブミンへのアセチル基付加によって引き起こされる可能性のあるコンフォメーション効果を評価している 。 文献上、血清アルブミンの修飾で最も議論されているのは、リジン残基のアセチル化である 。 ヒト血清アルブミンはまた、カルシウムの調節に影響を与えることによって、血小板凝固メカニズムに影響を与えることが観察されている。

Hemoglobin

おそらく血漿環境における最も重要な成分であるヘモグロビンは、試験管内でアスピリン依存性のアセチル化を受け、生体内で高用量のアスピリンで同様の変化を受けると推定される … アスピリンによるヘモグロビンのアセチル化の研究では、タンパク質の糖化が減少することが示され、高グルコース濃度ではアスピリンによるヘモグロビンのアセチル化が増加し、この効果は血清アルブミンにも観察されている。 アスピリンは、ヘモグロビンのα鎖およびβ鎖の様々なリジン残基をアセチル化することができるが、その構造的コンフォメーションや酸素結合および輸送機能には影響を及ぼさない。 ヘモグロビンは、血小板表面の受容体タンパク質の一つであるGP1βαと相互作用することにより、血小板凝集を引き起こすことができる。 比較的低濃度のヘモグロビンでも血小板凝集を引き起こすことができるが、アスピリンによるヘモグロビンのアセチル化がヘモグロビンと血小板の相互作用に及ぼす影響はまだわかっていない。

Effect of aspirin on the platelet releasate: implications for cancer

Cyclooxygenase inhibition and the concurrent reduction in thromboxane biosynthesis result to reduce platelet aggregation, expression of P-selectin, and attenuated clotting function.アスピリンは、血栓を抑制する効果があります。 血小板凝集を調節する役割に加え、アスピリンは血小板の発現・分泌タンパク質のプロファイルを変化させることも示されている。 これらのタンパク質の多くは、凝固反応を媒介し、傷害部位に免疫細胞を動員することに関与している。

アスピリンは、トロンビン受容体活性化ペプチド（SFLLRN）で刺激した血小板からのインターロイキン7（IL-7）の放出を阻害することが示されている。 また、アスピリンを服用した健康な患者さんは、血漿中のIL-7が有意に低いことが示されました。 この炎症性サイトカインは、B細胞およびT細胞の成熟に重要な役割を果たすことが示されている。 IL-7はまた、腫瘍促進作用と抗腫瘍作用の両方を持ち、後者は主にBCL2の制御によるアポトーシスの阻害から生じることが示されている . 血小板はまた、VEGFやアンジオポエチン-1を含む血管新生促進因子の供給源であり、アスピリンの常用が両因子の血漿濃度を低下させることを示唆するいくつかの証拠があるが、これが純粋に血小板放出量の機能であるかどうかは不明である … このことは、アスピリン療法が、血漿VEGFレベルの低下とトロンビン受容体を介した血小板からのTSP-1とVEGFの放出によって評価されるように、タモキシフェンを投与した乳癌女性において、全体的に血管新生のバランスを促進したように見えた臨床研究によって裏付けられる8390>

Coppinger らは、アスピリン治療の機能としての血小板放出物の組成について、質量分析ベースのプロテオーム研究を実施した。 この研究では、コラーゲン、SFLLRN、またはADPによる刺激後に低用量のアスピリン（20μM）でヒト血小板を処理すると、放出液に含まれるタンパク質の量が広く減少しましたが、この減少の程度は使用した作動薬に依存していました。 アスピリン処理により、血小板放出液中の成長調整成長因子（GRO）、血小板由来成長因子（PDGF）、アンジオジェニン、RANTES、オンコスタチンM（OSM）のレベルが、特にコラーゲンによる刺激後に低下することも見いだされた。 一方、これらのサイトカインや他の血小板由来サイトカイン（例． CXCL4 や CTGF ）が血管修復の制御に重要である一方で、腫瘍形成、血管新生、転移を促進する役割も担っている。

Defining the aspirin acetylome

上記のように、アスピリンは細胞内および細胞外のさまざまなタンパク質標的、特に側鎖とN末端のアミノ基をアセチル化することが知られている。 残念ながら、COX酵素以外のどの血小板タンパク質がアスピリンによってアセチル化されるのか、あるいはこれらの非正規のアセチル化の生物学的役割について、特に言及した包括的なプロテオーム研究はなされていない。 このセクションでは、アスピリンによるアセチル化の非正規の標的を同定するための過去のプロテオーム研究を考察し、それらを血小板プロテオミクスの現状と関連付けることを試みる。

様々な細胞株において、生理的濃度のアスピリンによってアセチル化するタンパク質群を定義しようとするプロテオーム研究が数多く行われている。 Bhatと共同研究者は、抗アセチルリジン抗体で濃縮した後、アスピリンによってアセチル化される33の細胞性タンパク質を同定した。 その後の質量分析により、グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ（G6PD）、乳酸デヒドロゲナーゼ、エノラーゼ、ピルビン酸キナーゼ、トランスケトラーゼなどのアセチル化細胞骨格および代謝酵素の存在が確認されたが、G6PDのみがin vitroにおいてアスピリンによるアセチル化によって著しく阻害されることが判明した。 このことは、アスピリンがペントースリン酸経路を介したフラックスを阻害している可能性を示唆しているが、これを確認するためにはさらなる研究が必要である。 このグループはまた、アスピリンがp53をアセチル化し、その結果、camptothecinの存在下でDNA結合、p21Cipの発現、アポトーシス細胞死を促進させることを示した 。 これらの効果は複数の腫瘍細胞株で実証されているが、血小板のプロテオームにはp53が存在せず、また血小板には機能的なゲノムがないことから、p53のアセチル化は血小板生物学にほとんど影響を及ぼさないことが示唆された。 アスピリンのアセチル基をペンチノイ酸で置換し、アルキンを含むアスピリン誘導体(AspAlk)を生成するアプローチがある。 アスピリンとは対照的に、AspAlkによるアセチル基の転移は、通常アスピリンによってアセチル化される部位にアジド反応性のアルキンを取り込ませることになる。 AspAlkを生きた大腸HCT-15細胞とインキュベートした後、AspAlkによってアセチル化されたタンパク質を銅触媒によるアジドアルキン環化付加反応（CuAAC）によってビオチンでタグ付けし、ストレプトアビジンプルダウンによって単離した。 LC-MSによる解析の結果、著者らは、DMSO対照に比べてAspAlkのアセチル化が有意に濃縮された120のタンパク質を同定することに成功した。 この研究で最も濃縮されたタンパク質は、タンパク質合成とフォールディングに関与するタンパク質、細胞骨格タンパク質、代謝酵素であった。 また、ヒストンのアセチル化も観察され、生化学的に確認された。 この研究は、Shen、Lin、および共同研究者による最近の論文で拡張された。彼らは、ビオチン結合とストレプトアビジンプルダウン後にAspAlk修飾タンパク質の回収を促進するために、酸にラベリング可能なビオチンアジドを使用した。 この戦略により、500以上のアセチル化タンパク質が同定された。 ターゲットリストのパスウェイ解析の結果、タンパク質合成やオートファジーなど多くの重要な細胞機能を制御しているmTOR経路でアセチル化が顕著であることが示された。 著者らは、HCT116大腸細胞およびマウス胚性線維芽細胞をアスピリンで処理すると、de novoタンパク質合成が減少し、オートファジーが誘導されることを示し、最初のプロテオミクス的観察を検証した。 アスピリンによるオートファジーの誘導は、オートファジーが正常な血小板機能に必須であり、血小板刺激時にアップレギュレートされることを示した最近の研究に照らしても、特に興味深い。 さらに、血小板のAtg7をノックアウトしたマウスモデルで示されたように、機能的なオートファジー機構は血小板の抗凝固活性に必須である。 アスピリンによるアセチル化と血小板のオートファジー誘導の機能的関係はまだ不明ですが、G6PD遮断によるペントースリン酸経路（PPP）の阻害や、リンゴ酸脱水素酵素やイソクエン酸脱水素酵素のアセチル化によるミトコンドリア呼吸の阻害は、オートファジーの誘因として知られる細胞内酸化的負担を増大させると思われます . あるいは、シャペロン、特に熱ショックタンパク質やペプチジルプロリルイソメラーゼのアスピリンによるアセチル化に関する十分な証拠があり、適切なタンパク質フォールディングを損ない、ミスフォールドしたタンパク質のオートファジーによる除去を引き起こす可能性がある

Tatham と共同研究者による最近の別のプロテオミクス研究では、3H 標識アスピリンを使用して、質量分析によって HeLa 細胞内のアスピリンによるアセチル化の場所を特定した。 このアプローチでは、トリチウム化アスピリンを使用することで、通常の酢酸と比較して+3 Daの質量シフトが生じ、アスピリンによるアセチル化と内因性のアセチル化をより正確に識別することが可能となった。 この手法により、3700以上のユニークなタンパク質において、12,000以上のアスピリンによるアセチル化が検出された。 興味深いことに、アスピリンによってアセチル化されるタンパク質の多くは、アスピリン非存在下でもアセチル化されていることが判明し、アスピリンが既存のタンパク質のアセチル化部位を「増幅」していることが示唆された。 また、この研究の著者らは、ほとんどの場合、特定のタンパク質のアセチル化可能な部位全体の7749>1%がアスピリンによってアセチル化されていることを発見し、内因性脱アセチル化酵素活性の薬理学的遮断なしに、非特異的アスピリンによるアセチル化の化学量論は重要な生物効果を生み出すには不十分かもしれないと示唆しています。

この研究はまた、ヒストン蛋白の有意なアセチル化を示し、アスピリンによるアセチル化の大部分は、N末端の尾部よりもむしろヒストンのコアで起こっていることがわかった。 ヒストンのアセチル化は多くのプロテオミクス研究で観察されており、ヒストンには静電的なDNA結合に重要な役割を果たす求核性リジン残基が多く存在することから、ある程度当然といえば当然である。 ヒストンのアセチル化は、DNA結合に重要な役割を果たすとともに、遺伝子発現を制御するエピジェネティックなメカニズムとしてよく知られている。 血小板は無核であるが、これまでのトランスクリプトーム研究により、血小板におけるヒストン特異的転写産物、特にH2A、H2B、H3、H4が同定されている . アスピリンによるヒストンのアセチル化については説得力があるが、血小板でのヒストンの発現については確認されていないことに注意が必要である。 むしろ、血小板におけるヒストン転写物の存在は、血小板を生み出す巨核球の異常な細胞循環によるものであると推測されている 。 さらに重要なことは、DNAレベルで発現を制御するヒストンの役割は、無核血小板には存在しないことです。

Effects of aspirin on platelet metabolism

好中球が主に解糖系であるのに対し、血小板代謝は主に酸化的である． 嫌気性解糖を阻害してもATPは減少せず、血小板の機能も阻害されない。 トリカルボン酸（TCA）サイクル酵素や電子伝達系（ETC）成分のアセチル化は、特に炭素代謝のリンゴ酸デヒドロゲナーゼ、脂質代謝の調節、アンモニア解毒の尿素サイクルのような代謝に関わる酵素に共通の調節方法であることが示されてきた。 従って、TCAサイクル酵素やETC成分のアセチル化は、血小板の生体エネルギーに大きな影響を与える可能性がある。 アスピリンのアセチル化に関するプロテオミクス研究では、糖質合成と脂肪酸合成の切り替えを制御するリンゴ酸脱水素酵素と、ミトコンドリアでサーチュイン（Sirt3およびSirt5）タンパク質を介して脱アセチル化によって制御されているイソクエン酸脱水素酵素のアスピリンによるアセチル化を一貫して明らかにしてきた。 サーチュイン脱アセチル化酵素活性は、ミトコンドリアマトリックス中の多くのTCA酵素と関連しており、抗酸化物質の再生、TCAフラックス調節、アナプルロジーを調節していると考えられている . このレビューの作成・印刷時点では、アスピリンによる代謝酵素のアセチル化の程度や代謝フラックスに対するアスピリンの効果に直接言及した研究を知らないが、プロテオミクス的証拠から、これは血小板生化学に対するアスピリンの重要な非正規効果である可能性があることが示唆された。

Effects of aspirin on platelet localization in tumors

New Evidence is emerging that platelets itself may play a significant role in carcinogenesis and more specifically in the development of metastasis.All Rights Reserved.アスピリンは血小板が発がんにおいて重要な役割を担っていることを示す。 腫瘍細胞を循環に直接注入するマウス転移モデルにおいて、循環血小板数を減少させる戦略は、腫瘍の負担を減らすのに効果的であることが証明されている。 可溶性フィブリンと腫瘍細胞を共注入して凝固効果を高めた転移モデルでの他の研究では、in vivoでの転移の発生率が増加することが示された . これらの研究は、可溶性フィブリンが培養条件下で血小板と腫瘍細胞の相互作用を増強するというin vitroの実験によって裏付けられた。 これらの研究は、予想されるフィブリンの増加に加えて、血小板凝集活性化が腫瘍細胞への血小板接着を増加させ、転移拡散を促進するという仮説を支持している。 フィブリンに加えて、追加の研究では、トロンビン、PAR-1、および凝固第VII因子（FVII）の役割、およびがん細胞の生存率の向上、がんの成長と拡散、腫瘍の悪性度の増加、および転移の支援との関連について検討されている.

全身循環における腫瘍細胞の生物学を調節することに加え、腫瘍細胞の成長において重要な役割を果たすことも示されてきた。 ある研究では、アスピリンが卵巣癌のin vitroとin vivoの両方で増殖細胞の程度を有意に減少させることが示された 。 また、この同じ研究では、腫瘍細胞と血小板を共培養した後、血小板の活性化が増殖と腫瘍細胞の成長を増加させることがわかった。 しかし、GPIβα、GPIIβIIIα、P-セレクチンなどの血小板接着受容体を阻害しても、血小板からの増殖作用は減弱されないことがわかった。 このことから、血小板から分泌されるタンパク質などが、腫瘍細胞の増殖を制御する役割を担っている可能性が考えられる。 例えば、血小板のTGF-β1が減少すると、血小板にさらされた卵巣癌細胞の増殖が減少することが観察されている 。 さらに、アスピリンは、TXA2やPGE2が関与するCOX-1メカニズムによって大腸癌の転移を防ぐことが示されており、活性化した血小板がCOX-1依存性のプロスタグランジン生成を通じて転移をサポートしていることが示唆されている。 最後に、新規のアスピリン-ホスホチジルコリン結合体（Aspirin-PC）は、VEGFとトロンボキサンの放出を通じて、血小板-腫瘍細胞誘導性の上皮間葉転換（EMT）を破壊することが示された。 また、この製剤は、卵巣癌や大腸癌の細胞モデルにおいて、細胞増殖や血管新生を抑制する一方で、アポトーシスを増加させることが確認されました.

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