Inleiding
De buisjes in de afbeelding worden schuin gehouden om de coagulatie van het konijnenplasma aan te tonen na incubatie van gecitreerd konijnenplasma met culturen van Staphylococcus aureus (bovenste buisje) of Staphylococcus epidermidis (onderste buisje). Let op de enigszins troebele gel-achtige klonter in het bovenste buisje dat het coagulase-positieve organisme bevat. Het plasma in het onderste buisje dat het coagulase-negatieve organisme bevat, blijft niet in de buurt van de bodem van het buisje wanneer het schuin wordt gehouden.
Methodes
Bacteriële culturen van S. aureus en S. epidermidis werden gedurende 16 uur bij 37oC geïncubeerd in tryptische sojabouillon. Een tiende milliliter van elke cultuur werd in een glazen buisje met 0,4 ml gecitreerd konijnenplasma (Lampmire Biological Laboratories) gebracht. Beide buisjes, het ene met S. aureus en het andere met S. epidermidis, werden gedurende 24 uur geïncubeerd in een waterbad van 37oC. Het coagulase-positieve organisme, S. aureus, deed het plasma in het buisje stollen (zie bovenste buisje in de afbeelding), terwijl het coagulase-negatieve organisme, S. epidermidis, dat niet deed (zie onderste buisje in de afbeelding). Er zijn twee soorten coagulase die door de meeste stammen van S. aureus worden geproduceerd: gebonden coagulase, ook klonterfactor genoemd, en vrije coagulase. Gebonden coagulase zit vast aan de bacteriële celwand en kan fibrinogeen in plasma enzymatisch omzetten in onoplosbaar fibrine, waardoor de bacteriecellen gaan klonteren. In deze specifieke test wordt geen klontering van de bacteriën waargenomen. Deze specifieke test is een betere maat voor het vermogen van het organisme om extracellulaire of vrije coagulase te produceren. Vrij coagulase reageert met een globuline plasma factor (coagulase-reagerende factor) om staphylothrombine te vormen. Staphylothrombine katalyseert vervolgens de afbraak van fibrinogeen tot onoplosbaar fibrine. De onoplosbare fibrine vormt dan de klonter die te zien is in het bovenste buisje in de afbeelding. De buisjes werden onder een hoek gehouden en het beeld werd verkregen met een Olympus C-3040 3,3-megapixel digitale camera.
Discussie
S. aureus is een veelvoorkomende oorzaak van huid- (impetigo, steenpuisten, karbonkels, en folliculitis), weke delen- (cellulitis), bot- (osteomyelitis), en gewrichts (septische artritis) infecties. Deze Staphylococcus-soort kan ook een aantal toxinegemedieerde ziekten bij de mens veroorzaken, zoals voedselvergiftiging, verbrande huid en toxisch shocksyndroom. Er zijn verschillende andere stafylokokkensoorten die de mens koloniseren. Deze Staphylococcus-soorten worden minder vaak in verband gebracht met ziekten bij de mens, maar zijn vaak aanwezig in monsters van huid- en weke delen. De coagulasetest is één manier om de hoogpathogene S. aureus te onderscheiden van de andere, minder pathogene stafylokokkensoorten op het menselijk lichaam. S. aureus is een coagulase-positief organisme, terwijl alle andere stafylokokkensoorten die de mens koloniseren coagulase-negatief zijn
1. Berke, A., en R.C. Tilton. 1986. Evaluation of rapid coagulase methods for the identification of Staphylococcus aureus. J Clin. Microbiol. 23:916-919.
2. Kloos, W. E., en K. H. Schleifer. 1975. Simplified scheme for routine identification of human Staphylococcus species. J. Clin. Microbiol. 1:82-88.
3. Murray, P. R., K. S. Rosenthal, and M. A. Pfaller. 2009. Staphylococcus and related gram-positive cocci, p. 211-214. In P. R. Murray, K. S. Rosenthal, and M. A. Pfaller (ed.), Medical microbiology, 6th ed. Mosby Elsevier Publishers, Philadelphia, PA.
4. Yrios, J. W. 1977. Comparison of rabbit and pig plasma in the tube coagulase test. J. Clin. Microbiol. 5 :221-224.
