Confused?
- Formaldehyde is CH2O, de eenvoudigste aldehyde.
- Formalin is de naam voor verzadigde (37%) formaldehyde-oplossing. Een protocol dat 10% formaline vraagt, komt dus ongeveer overeen met 4% formaldehyde. Pas echter op, dat sommige oplossingen methanol in hen hebben om polymerisatie te stoppen, maar dit kan een negatief effect hebben op uw monster.
- Paraformaldehyde (PFA) is eigenlijk gepolymeriseerd formaldehyde. “Zuivere”, methanolvrije formaldehyde kan worden gemaakt door de vaste PFA te verhitten. Dit zou paraformaldehyde kunnen worden genoemd, maar dat is het eigenlijk niet omdat het niet de polymeervorm is. U kunt EM-kwaliteit formaldehyde kopen of u kunt uw eigen …
Paraformaldehyde-oplossing
4% paraformaldehyde wordt gewoonlijk gemaakt in PBS of TBS bij 70 °C met enkele druppels 5N NaOH om de oplossing helderder te helpen maken. Bereid 4% paraformaldehyde oplossing in een chemische kap als je niet wilt worden licht gefixeerd jezelf.
Vaak PFA voorraden hebben onoplosbare onzuiverheden en het is het beste dat deze worden verwijderd via een snelle spin in een tafelblad centrifuge of door het passeren van de bereide oplossing door een filter spuit. Het is ook belangrijk te beseffen dat de werkzaamheid en het gehalte aan onzuiverheden van PFA in poedervorm sterk kunnen variëren van lotnummer tot lotnummer van het reagens. Wees niet verbaasd als uw fixatie concentraties & voorwaarden moeten worden tweeked wanneer u een nieuwe fles PFA.
U kunt de oplossing, maar alle oplossingen gaan slecht met de tijd, zodat het gebruik van vers bereide oplossingen die kleurloos zijn is vaak het beste. (Het opslaan van aliquotes bij -20 °C en het gebruik ervan gedurende een paar maanden is typisch).
