- Abstract
- 1. Wprowadzenie
- 2. Materiały i Metody
- 2.1. Przygotowanie diety
- 2.2. Eksperyment żywieniowy
- 2.3. Pobieranie próbek
- 2.4. Oznaczanie enzymów trawiennych
- 2.5. 16S rRNA Gene Amplification and Illumina Sequencing
- 2.6. Analiza statystyczna
- 3. Wyniki
- 3.1. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on Fish Growth
- 3.2. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on Digestive Enzyme Activity
- 3.3. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on Intestinal Microbial Diversity and Richness
- 3.4. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on the Composition and Changes in the Main Microbiota in the Intestine of the Songpu Mirror Carp
- 4. Dyskusja
- Data Availability
- Konflikt interesów
- Podziękowania
Abstract
Prezentowane badania przeprowadzono w celu oceny wpływu diety z dodatkiem Bacillus megaterium na wydajność wzrostu, enzymy trawienne i różnorodność mikrobiomu jelitowego u karpia lustrzenia Songpu (Cyprinus specularis Songpu). Ryby były karmione ręcznie dwiema dietami (kontrolną i pokrytą B. megaterium) trzy razy dziennie do momentu osiągnięcia sytości przez 56 dni. W porównaniu z grupą kontrolną, suplementacja dietą pokrytą B. megaterium poprawiła wzrost ryb i znacząco zmniejszyła współczynnik konwersji paszy (). Aktywności amylazy i lipazy w jelicie przednim w grupie poddanej działaniu preparatu były znacząco wyższe niż w grupie kontrolnej (). Aktywność proteaz jelita przedniego, środkowego i tylnego w grupie leczonej była wyższa niż w grupie kontrolnej (). Wyniki sekwencjonowania genów 16S rDNA mikrobioty poprzez sekwencjonowanie o wysokiej wydajności pokazały, że różnorodność i liczebność mikroflory jelitowej wzrastała wraz ze wzrostem lustrzanego karpia Songpu. Lustrzane karpie Songpu karmione dietą pokrytą B. megaterium wykazywały zwiększony udział jelitowych bakterii Bacillus i Lactococcus na poziomie rodzaju, a oba te wskaźniki były znacząco wyższe niż w grupie kontrolnej (). Wyniki te sugerują zatem, że stosowanie B. megaterium w diecie może poprawić wzrost i aktywność enzymów trawiennych karpia lustrzanego Songpu oraz wzbogacić korzystny skład rodzajowy jego głównej mikroflory jelitowej.
1. Wprowadzenie
Ryby, jako jedno z głównych dietetycznych źródeł białka zwierzęcego, odgrywają bardzo ważną rolę w strukturze żywności człowieka. Jednak w ostatnich latach bezpieczeństwo produktów wodnych stało się jednym z największych czynników hamujących rozwój produktów wodnych ze względu na obawy dotyczące bezpieczeństwa hormonów, antybiotyków i nadmiernej ilości mikroorganizmów. Wraz z szybkim rozwojem intensywnej hodowli o dużej gęstości, środowisko wodne akwakultury pogarsza się z dnia na dzień, co prowadzi do wybuchów chorób, a nawet masowych zgonów zwierząt hodowlanych. Istnieje pilna potrzeba znalezienia przyjaznych dla środowiska i bezpiecznych alternatyw, aby zapewnić zdrowy wzrost zwierząt hodowlanych .
Jako nowy dodatek do paszy po erze antybiotyków, probiotyki są uważane za ważne substytuty antybiotyków paszowych . Badania wykazały, że stosowanie probiotyków nie tylko może promować wzrost zwierząt wodnych i poprawić ich przeżywalność, ale także może zmniejszyć częstość występowania chorób zwierząt wodnych. Bacillus jest saprofityczną bakterią gram-dodatnią powszechnie występującą w środowisku hodowlanym. Badania i zastosowanie Bacilli w dziedzinie akwakultury przyciągnęły wiele uwagi. Pierwsze zastosowanie probiotyków w akwakulturze zostało przeprowadzone poprzez zrównoważenie populacji bakterii w wodzie i przyniosło dobre rezultaty. Niektóre badania wykazały, że dodanie Bacillus subtilis do paszy nie tylko może promować wzrost zwierząt wodnych i poprawić aktywność ich enzymów trawiennych i ich odporność nieswoistą, ale także może poprawić strukturę ich mikroflory jelitowej. W połowie XX wieku chińscy uczeni zaczęli badać Bacillus megaterium, koncentrując się głównie na badaniach przesiewowych szczepów, w szczególności na ich zdolności do rozkładu materii organicznej, ich metabolizmie azotu i ich zastosowaniu jako probiotyków w oczyszczaniu ścieków akwakultury .
Karp pospolity (Cyprinus carpio) jest najszerzej hodowanym gatunkiem ryb słodkowodnych w Chinach, a produkcja karpia pospolitego wynosiła 2 962 218 t w 2018 roku . Songpu mirror carp (Cyprinus specularis Songpu), odmiana karpia pospolitego, stanowi coraz większą część produkcji ze względu na stosunkowo szybszy wzrost, lepszą odporność na choroby, wyższy współczynnik konwersji mięsa i prawie brak łusek na powierzchni ciała . Jednak wraz z ekspansją i promocją hodowli o wysokiej gęstości, rosnącą częstotliwością karmienia i zanieczyszczeniem wody, problemy związane z bezpieczeństwem i jakością żywności stały się coraz poważniejsze.
Składniki odżywcze należą do najważniejszych i najłatwiej regulowanych czynników wpływających na odporność zwierząt wodnych. Mikrobiologia żywności obejmuje mikroorganizmy, które mają zarówno korzystny, jak i szkodliwy wpływ na jakość i bezpieczeństwo żywności, a zatem mogą być niepokojące dla zdrowia publicznego. W tym badaniu mieliśmy na celu ocenę wpływu diety pokrytej B. megaterium na wzrost, aktywność enzymów trawiennych i różnorodność mikrobiomu jelitowego u karpia lustrzeńca Songpu oraz dostarczenie teoretycznych podstaw dla praktyki zdrowej i ekologicznej hodowli ryb.
2. Materiały i Metody
2.1. Przygotowanie diety
B. megaterium została przygotowana w naszym laboratorium. Zawartość B. megaterium wynosiła . Pasza komercyjna została zakupiona od Zhejiang AIPHA Feed Co., Ltd., Chiny. Gwarantowane wartości analizy składu produktów paszowych przedstawiono w tabeli 1. Bulion fermentacyjny z B. megaterium został równomiernie rozpylony na powierzchni materiału handlowego w ilości 100 ml/kg, a następnie rozpylona pasza została umieszczona w chłodnym miejscu na 1 h, po czym została użyta jako pasza dla grupy doświadczalnej. Grupa kontrolna była karmiona niezmienioną paszą handlową.
|
||||||||||||||||||||||||
2.2. Eksperyment żywieniowy
Karpie lustrzeńce (Cyprinus specularis Songpu) (masa ciała ) pozyskano ze Stacji Doświadczalnej Hulan Instytutu Badań Rybołówstwa Rzeki Heilongjiang w prowincji Heilongjiang, Chiny (45,97°N, 126,63°E). Ryby były aklimatyzowane do warunków laboratoryjnych przez 14 dni i przystosowane do paszy kontrolnej przed rozpoczęciem eksperymentu. Następnie wybrano 90 zdrowych karpi lustrzeńca Songpu i losowo podzielono je na dwie grupy (grupa kontrolna i grupa doświadczalna). Każde leczenie przeprowadzono w trzech powtórzeniach, a każde powtórzenie zawierało 15 ryb. Grupa kontrolna była karmiona paszą komercyjną. Grupę kontrolną karmiono paszą komercyjną pokrytą B. megaterium. Dzienna dawka pokarmu wynosiła 3% masy ciała lustrzanego karpia Songpu, trzy razy dziennie o godzinie 08:00, 12:00 i 19:00. Cały okres doświadczalny trwał 56 dni. W czasie trwania eksperymentu woda w laboratorium była wymieniana o 1/3 objętości wody tygodniowo. Jakość wody była mierzona (za pomocą YSI professional plus, Ohio State, USA) codziennie podczas okresu doświadczalnego, temperatura wody wahała się od 18 do 25°C, a sprężarka powietrza była używana do dodawania tlenu 24 godziny na dobę. Ryby ważono zarówno na początku, jak i na końcu próby karmienia.
2.3. Pobieranie próbek
Przed eksperymentem karmienia, dziesięć ryb zostało losowo pobranych z tymczasowego zbiornika hodowlanego, a ich początkowe masy ciała zostały zmierzone. Następnie pobrano przewód jelitowy do pomiaru początkowej mikroflory jelitowej (grupa wstępna). Na koniec 56-dniowego okresu karmienia, około 24 h po ostatnim karmieniu, wszystkie ryby znieczulono MS-222 rozcieńczonym w wodzie w stężeniu 75 mg/l. Ryby policzono i zważono. Ryby te policzono i zważono w celu określenia wskaźnika przyrostu masy (WGR), specyficznego wskaźnika wzrostu (SGR) i wskaźnika konwersji paszy (FCR, Tabela 2) .
|
|||||||||||||||||||||||||||
|
Uwaga: w tym samym wierszu wartości z różnymi indeksami górnymi małymi literami oznaczają istotną różnicę (), natomiast wartości z indeksami górnymi takimi samymi lub bez liter oznaczają brak istotnej różnicy (). . . .
|
|||||||||||||||||||||||||||
Po uzyskaniu ostatecznej wagi wszystkich ryb, pięć ryb z każdego zbiornika zostało losowo wybranych i umieszczonych na płycie lodowej w celu szybkiej dysekcji. Próbki tkanek, w tym jelito przednie, jelito środkowe i jelito tylne, pobierano aseptycznymi nożyczkami, przemywano aseptycznym roztworem soli fizjologicznej, ważono, a następnie przygotowywano do homogenatu z aseptycznym roztworem soli fizjologicznej (1 : 4). Wszystkie próbki były natychmiast przechowywane w temperaturze -80°C w zamrażarce w celu oznaczenia enzymów trawiennych. Z każdego zbiornika losowo pobrano również próbki od kolejnych pięciu ryb. Powierzchnie ryb zostały zdezynfekowane 75% alkoholem zanim ryby zostały zabrane do pomieszczenia bioclean. Po dalszej dezynfekcji, jamę brzuszną otwierano, zewnętrzną część jelita przecierano 75% alkoholem i czterokrotnie płukano sterylną wodą, a następnie pobierano jelito do oceny końcowej mikroflory jelitowej.
2.4. Oznaczanie enzymów trawiennych
Przed pomiarem indeksów odpornościowych, połączone jelito przednie, jelito środkowe i jelito tylne homogenizowano ręcznie w szklanym homogenizatorze z 0,86% NaCl (/) w celu uzyskania 10% homogenatu. Po odwirowaniu (4000 rpm, 10 min) w temperaturze 4°C uzyskano supernatant, składający się głównie z surowego płynu enzymatycznego. Aktywność amylazy, proteazy i lipazy w jelicie przednim, środkowym i tylnym analizowano spektrofotometrycznie przy użyciu zestawów odczynników diagnostycznych (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Chiny).
2.5. 16S rRNA Gene Amplification and Illumina Sequencing
Mikrobiologiczny DNA ekstrahowano z próbek jelitowych przy użyciu zestawu E.Z.N.A.® Soil DNA Kit (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, USA) zgodnie z protokołami producenta. Końcowe stężenie DNA i stopień oczyszczenia określono za pomocą spektrofotometru NanoDrop 2000 UV-vis (Thermo Scientific, Wilmington, USA), a jakość DNA określono za pomocą elektroforezy na 1% żelu agarozowym. Regiony hiperzmienne V4-V5 bakteryjnych genów 16S rRNA amplifikowano za pomocą starterów 515F (5-GTGCCAGCMGCCGCGG-3) i 907R (5-CCGTCAATTCMTTTRAGTT-3) przy użyciu termocyklera PCR (GeneAmp 9700, ABI, USA). PCR przeprowadzono z zastosowaniem następującego programu: 3 min denaturacji w 95°C, 27 cykli po 30 s w 95°C, 30 s na annealizację w 55°C i 45 s na elongację w 72°C oraz końcowe przedłużenie w 72°C przez 10 min. Otrzymane produkty PCR ekstrahowano z 2% żelu agarozowego i dalej oczyszczano przy użyciu zestawu do ekstrakcji żelowej DNA AxyPrep (Axygen Biosciences, Union City, CA, USA) i oznaczano ilościowo przy użyciu QuantiFluor™-ST (Promega, USA) zgodnie z protokołem producenta. Oczyszczone amplikony połączono w równe ilości i poddano sekwencjonowaniu parami () na platformie Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, USA) zgodnie ze standardowymi protokołami firmy Majorbio Bio-Pharm Technology Co., Ltd. (Szanghaj, Chiny). (Szanghaj, Chiny) .
2.6. Analiza statystyczna
Operacyjne jednostki taksonomiczne (OTU) zostały zgrupowane z 97% odcięciem podobieństwa przy użyciu UPARSE (wersja 7.1, http://drive5.com/uparse/) z nowatorskim algorytmem „zachłannym”, który jednocześnie wykonuje filtrowanie chimery i grupowanie OTU. Taksonomię każdej sekwencji genu 16S rRNA analizowano za pomocą algorytmu RDP Classifier (http://rdp.cme.msu.edu/) względem bazy danych SILVA 16S rRNA, stosując próg ufności 70%. Indeksy Chao i ACE zostały wybrane do identyfikacji bogactwa społeczności, a indeksy Shannona i Simpsona zostały użyte do identyfikacji różnorodności społeczności. Wszystkie te indeksy w naszych próbkach zostały obliczone za pomocą QIIME (wersja 1.7.0) i przygotowane do wyświetlenia za pomocą oprogramowania R (wersja 2.15.3). Analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu pakietu oprogramowania statystycznego SPSS 20.0 (SPSS, Chicago, IL, USA). Dane wyrażono jako sumę trzech powtórzeń. Dane poddano jednokierunkowej analizie wariancji ANOVA, a w przypadku stwierdzenia różnic, średnie uszeregowano za pomocą testu wielokrotnych porównań Duncana. Różnice uznano za istotne przy poziomie
3. Wyniki
3.1. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on Fish Growth
As shown in Table 2, the weight gain rate and specific growth rate of the treatment group (71.03%, 0.42% day-1) were significantly increased compared with those of the control group (52.75%, 0.33% day-1, ), and the feed conversion ratio of the treatment group (1.28) was significantly lower than that of the control group (2.23, ). Nie zaobserwowano śmiertelności w ciągu 56 dni próby żywieniowej.
3.2. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on Digestive Enzyme Activity
Wpływ diety z dodatkiem B. megaterium na aktywność enzymów trawiennych przedstawiono w tabeli 3. Aktywność amylazy w jelicie przednim w grupie leczonej była istotnie wyższa niż w grupie kontrolnej (). Aktywność amylazy w jelicie środkowym i tylnym w grupie leczonej była istotnie wyższa niż w grupie kontrolnej, ale nie było istotnych różnic (). Aktywność proteazy w jelicie przednim, środkowym i tylnym w grupie leczonej była wyższa niż w grupie kontrolnej, ale nie było istotnych różnic (). Aktywność lipazy w jelicie przednim w grupie leczonej była znacząco wyższa niż w grupie kontrolnej (). Aktywności lipazy jelita środkowego i tylnego w grupie leczonej były w zasadzie takie same jak w grupie kontrolnej i nie było istotnych różnic ().
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
Uwaga: w tej samej kolumnie, wartości z różnymi indeksami górnymi małymi literami oznaczają istotną różnicę (), natomiast wartości z takimi samymi indeksami górnymi lub bez nich oznaczają brak istotnej różnicy ().
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.3. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on Intestinal Microbial Diversity and Richness
Różnorodność mikrobiomu jelitowego lustrzanego karpia Songpu określono metodą sekwencjonowania o wysokiej wydajności. Średnia liczba OTU wykrytych z początkowej próbki grupy wynosiła 63. Po 56 dniach, średnia liczba OTU wykrytych w grupach kontrolnej i leczonej wynosiła odpowiednio 114 i 196. Wskaźnik pokrycia wszystkich próbek wynosił powyżej 0,97, co wskazuje na wysoki wskaźnik wykrywalności. Jak pokazano w Tabeli 4, indeksy Chao i ACE, które odzwierciedlają bogactwo mikroflory jelitowej lustrzanego karpia Songpu, były znacząco wyższe w grupie leczonej po 56 dniach niż w grupie kontrolnej i początkowej (). Indeks Shannona różnorodności zbiorowiska jelitowego w grupie leczonej był istotnie wyższy niż w grupie kontrolnej (). Indeks Simpsona różnorodności zbiorowisk jelitowych w grupie leczonej był istotnie niższy niż w grupie kontrolnej (). Nie było istotnych różnic dla powyższych czterech indeksów pomiędzy grupą kontrolną a grupą wyjściową ().
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
Uwaga: w tej samej kolumnie wartości z różnymi indeksami górnymi małymi literami oznaczają istotną różnicę (), natomiast wartości z takimi samymi indeksami górnymi lub bez nich oznaczają brak istotnej różnicy ().
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.4. Effect of the B. megaterium-Coated Diet on the Composition and Changes in the Main Microbiota in the Intestine of the Songpu Mirror Carp
Za główną mikroflorę przyjęto bogactwo mikrobiomu jelitowego wynoszące ponad 1% na poziomie azylu dla statystyk przedstawionych na Rycinie 1. Przed rozpoczęciem doświadczenia w jelitach grupy wyjściowej dominowały Fusobacteria (86,36%) i Bacteroidetes (8,60%). Po 56-dniowym okresie żywienia w każdej z grup nastąpił wzrost liczebności głównej mikroflory jelitowej. W grupie kontrolnej dominującymi fagami były Fusobacteria (86,36%), Bacteroidetes (14,4%), Firmicutes (2,42%) i Proteobacteria (1,37%). W grupie leczonej dominującymi fyllami były Firmicutes (69,15%), Proteobacteria (23,8%), Bacteroidetes (4,65%) i Actinobacteria (1,43%). Za mikroflorę główną do obliczeń statystycznych przyjęto bogactwo drobnoustrojów jelitowych powyżej 0,5% na poziomie rodzaju, co przedstawiono w tabeli 5. W grupie wyjściowej było tylko 5 rodzajów głównych mikroorganizmów jelitowych. Po 56-dniowej próbie żywieniowej liczebność głównych mikroorganizmów jelitowych wzrosła do 11 rodzajów w grupie leczonej. Najbardziej obfitym mikroorganizmem w jelicie lustrzanego karpia Songpu w grupie początkowej było Cetobacterium. Po 56-dniowym okresie karmienia, najliczniejszym mikroorganizmem w grupie kontrolnej było nadal Cetobacterium. W grupie kontrolnej, 11 dominującymi rodzajami były Bacillus, Lactococcus, Pseudomonas, Stenotrophomonas, Psychrobacter, Brochothrix, Myroides, Arthrobacter, Flavobacterium, Comamonadaceae_unclassified i Yersinia. Lustrzany karp Songpu karmiony dietą pokrytą B. megaterium wykazywał zwiększone proporcje jelitowych bakterii Bacillus i Lactococcus na poziomie rodzaju, które były znacząco wyższe niż w grupie kontrolnej ().
| Genus | Treatments | |||
| Initial | Control | B. megaterium | ||
| Cetobacterium | – | |||
| Lactococcus | – | – | ||
| Bacillus | – | |||
| Bacillus | – | – | ||
| Enterobacteriaceae_unclassified | – | – | – | |
| Bacteroides | – | |||
| Comamonadaceae_unclassified | – | |||
| Częstość występowania | Comamonadaceae_unclassassified | – | ||
| Yersinia | – | |||
| Pseudomonas | – | – | ||
| Pseudoxanthomonas | – | – | ||
| Fusobacteriales_unclassassified | – | |||
| Stenotrophomonas | – | – | ||
| Psychrobacter | – | – | ||
| Leucobacter | – | – | – | |
| Brochothrix | – | – | – | |
| Myroides | – | |||
| Barnesiella | – | |||
| Rhodobacter | – | – | – | |
| Arenimonas | – | |||
| Clostridium | – | |||
| Arthrobacter | – | – | ||
| Arthrobacter | – | – | ||
| Flavobacterium | – | |||
| Others | ||||
4. Dyskusja
Probiotyki takie jak Bacilli były szeroko stosowane w akwakulturze. Niektóre badania wykazały, że dodatek różnych szczepów Bacillus spp. do paszy dla larw osiągnął dobre wyniki i ma dobry efekt promujący wzrost larw ryb. Dodatek bakterii (szczep CA2) jako suplementu diety do ksenogenicznych hodowli larw ostrygi Crassostrea gigas konsekwentnie poprawiał wzrost larw w różnych porach roku. Manipulacja mikrobiotą przy użyciu probiotyków została uznana za wartościową praktykę w akwakulturze w celu kontrolowania lub hamowania patogennych bakterii oraz poprawy wydajności wzrostu i aktywności enzymów trawiennych. W porównaniu z nieleczoną grupą kontrolną, końcowa waga i przyrost masy ciała były znacznie większe u krewetek karmionych mieszanką dwóch diet probiotycznych. W tym badaniu stwierdzono, że dieta pokryta B. megaterium zwiększyła wskaźnik przyrostu masy ciała i specyficzny wskaźnik wzrostu oraz zmniejszyła współczynnik konwersji paszy, wskazując, że diety pokryte B. megaterium mogą promować wzrost Songpu mirror carp. Podobne wyniki stwierdzono u sumów Clarias sp., gdzie dodatek B. megaterium PTB 1.4 do ich paszy znacząco poprawił ich tempo wzrostu. Podobne wyniki stwierdzono również u Penaeus monodon, dla którego wyższe wartości FCR i SGR uzyskano po dodaniu Bacillus cereus .
Bakterie probiotyczne są zdolne do wytwarzania enzymów trawiennych, które pomagają rybom wykorzystywać składniki odżywcze paszy i trawić je . Dodatek B. megaterium do posiłków z białka roślinnego może promować rozwój morfologii jelit i zwiększać aktywność enzymów trawiennych. Badanie probiotyków dla karpia Cyprinus carpio oparte na wynikach wzrostu i aktywności enzymów trawiennych wykazało, że średnie aktywności enzymów trawiennych wszystkich grup, w których stosowano probiotyki, różniły się znacząco od aktywności enzymów trawiennych w grupie kontrolnej. W obecnym badaniu, dieta z dodatkiem B. megaterium miała pozytywny i istotny wpływ na aktywność enzymów trawiennych, szczególnie amylazy i proteazy w jelicie przednim, środkowym i tylnym. Podobne wyniki stwierdzono również u tilapii, które wykazały poprawę trawienia pokarmu i wzrostu po dodaniu Bacillus NP5 do ich paszy. Wyższy poziom aktywności enzymów uzyskany w dietach zawierających probiotyki poprawił trawienie białka, skrobi, tłuszczu i celulozy, co z kolei może tłumaczyć lepszy wzrost zaobserwowany w dietach uzupełnionych probiotykami. Enzymy trawienne pomagają rybom rozkładać i trawić składniki odżywcze w paszy, ułatwiając rybom wchłanianie składników odżywczych w paszy .
Postępy w sekwencjonowaniu o wysokiej wydajności umożliwiły obszerny katalog próbek metagenomicznych, zapewniając wgląd w różnorodność gatunków drobnoustrojów z wielu różnych źródeł, w tym oceanu, gleby i ludzkiego ciała. Badania te wykorzystują zarówno sekwencjonowanie genu 16S rRNA w celu określenia relacji filogenetycznych, jak i bardziej kompleksowe sekwencjonowanie typu shotgun w celu przewidzenia szczegółowego składu gatunkowego i genowego. Indeks bogactwa i indeks różnorodności są ważnymi wskaźnikami do wykrywania różnorodności i złożoności mikroorganizmów w próbkach. W tym badaniu, wraz ze wzrostem Songpu mirror carp, różnorodność i bogactwo mikrobiomu jelitowego zostały zwiększone, a indeksy Chao i ACE, które odzwierciedlają bogactwo mikroflory jelitowej Songpu mirror carp, były znacznie wyższe w grupie leczonej niż w grupie kontrolnej. Ponadto, indeks Shannona różnorodności zbiorowisk jelitowych w grupie leczonej był znacząco wyższy niż w grupie kontrolnej. Wyniki badań wykazały również, że struktura mikroflory jelitowej uległa zmianie, gdy młode leszcze tęporogie były karmione dietami uzupełnionymi różnymi poziomami Bacillus subtilis. Dodanie probiotyków do paszy może również zmienić liczbę i strukturę pierwotnej mikroflory w przewodzie jelitowym Litopenaeus vannamei i promować złożone interakcje między wspólnotami mikrobiologicznymi w przewodzie jelitowym Litopenaeus vannamei .
W tym badaniu, Songpu mirror carp karmione dietą pokrytą B. megaterium wykazały zwiększone proporcje jelitowych Bacillus i Lactococcus na poziomie rodzaju, które były znacznie wyższe niż w grupie kontrolnej. Wyniki wskazały również, że skład i proporcje głównej mikrobioty w jelicie lustrzanego karpia Songpu mogą być zmienione przy użyciu diety pokrytej B. megaterium. Podsumowując, stosowanie diet pokrytych B. megaterium może znacząco poprawić wzrost ryb i zmniejszyć współczynnik konwersji paszy, poprawić aktywność enzymów trawiennych i wzbogacić korzystny skład gatunkowy głównej mikroflory jelitowej.
Data Availability
Wszystkie dane zostały dostarczone w artykule i nie ma więcej danych do załadowania.
Konflikt interesów
Autorzy deklarują, że nie mają konfliktu interesów do ujawnienia.
Podziękowania
Niniejsze badanie zostało sfinansowane przez Central-Level Non-Profit Scientific Research Institutes Special Funds (no. HSY202005M), Natural Science Foundation of Heilongjiang Province (no. QC2018038), the Central Public-interest Scientific Institution Basal Research Fund, Chinese Academy of Fishery Sciences (nos. 2017HY-ZD0507, 2019XT0502, and 2020TD56), the National Key R&D Program of China (no. 2019YFD0900302), oraz Key Laboratory of Freshwater Aquatic Biotechnology and Breeding, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Heilongjiang Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences (nr FBB2017-04).
.
