Wprowadzenie
Rurki na obrazie są trzymane pod kątem, aby zademonstrować koagulację osocza króliczego po inkubacji cytrynizowanego osocza króliczego z hodowlami Staphylococcus aureus (górna probówka) lub Staphylococcus epidermidis (dolna probówka). Zwróć uwagę na lekko mętny, żelopodobny skrzep w górnej probówce zawierającej organizm koagulazo-dodatni. Plazma w dolnej probówce zawierającej organizm koagulazo-ujemny nie pozostaje w pobliżu dna probówki, gdy jest trzymana pod kątem.
Metody
Hodowle bakteryjne S. aureus i S. epidermidis inkubowano w temperaturze 37oC przez 16 godzin w bulionie z soi tryptycznej. Jedną dziesiątą mililitra każdej hodowli umieszczano w szklanej probówce zawierającej 0,4 ml cytrynizowanego osocza króliczego (Lampmire Biological Laboratories). Obie probówki, jedna zawierająca S. aureus i druga zawierająca S. epidermidis, były inkubowane w łaźni wodnej o temperaturze 37oC przez 24 godziny. Organizm koagulazododatni, S. aureus, spowodował, że osocze utworzyło skrzep w probówce (patrz górna probówka na obrazku), podczas gdy organizm koagulazoujemny, S. epidermidis, nie spowodował tego (patrz dolna probówka na obrazku). Istnieją dwa rodzaje koagulazy wytwarzanej przez większość szczepów S. aureus, koagulaza związana zwana również czynnikiem zlepiającym oraz koagulaza wolna. Związana koagulaza jest przyłączona do ściany komórki bakteryjnej i może enzymatycznie przekształcać fibrynogen w osoczu w nierozpuszczalną fibrynę i powodować zlepianie się komórek bakteryjnych. W tym szczególnym teście zlepianie się bakterii nie jest widoczne. Ten szczególny test jest lepszą miarą zdolności organizmu do wytwarzania pozakomórkowej lub wolnej koagulazy. Wolna koagulaza reaguje z globulinowym czynnikiem plazmatycznym (czynnik reagujący z koagulazą) tworząc stafylotrombinę. Stafylotrombina następnie katalizuje rozpad fibrynogenu do nierozpuszczalnej fibryny. Nierozpuszczalna fibryna tworzy następnie skrzep, który jest widoczny w górnej probówce na zdjęciu. Rurki trzymano pod kątem, a obraz uzyskano aparatem cyfrowym Olympus C-3040 3,3-megapikselowym.
Dyskusja
S. aureus jest częstą przyczyną zakażeń skóry (liszajec, czyraki, karbunkuły i zapalenie mieszków włosowych), tkanek miękkich (cellulitis), kości (osteomyelitis) i stawów (septyczne zapalenie stawów). Ten gatunek Staphylococcus może również powodować szereg chorób ludzkich wywołanych przez toksyny, takich jak zatrucia pokarmowe, zespół oparzonej skóry i zespół wstrząsu toksycznego. Istnieje kilka innych gatunków gronkowców, które kolonizują człowieka. Te gatunki Staphylococcus są rzadziej związane z chorobami człowieka, ale są częstymi kontaminantami w próbkach pobranych z uszkodzeń skóry i tkanek miękkich. Test koagulazowy jest jednym ze sposobów na odróżnienie wysoce patogennego S. aureus od innych, mniej patogennych gatunków gronkowców występujących w organizmie człowieka. S. aureus jest organizmem koagulazo-dodatnim, podczas gdy wszystkie inne gatunki gronkowców, które kolonizują człowieka są koagulazo-dodatnie
1. Berke, A., and R. C. Tilton. 1986. Evaluation of rapid coagulase methods for the identification of Staphylococcus aureus. J Clin. Microbiol. 23:916-919.
2. Kloos, W. E., and K. H. Schleifer. 1975. Simplified scheme for routine identification of human Staphylococcus species. J. Clin. Microbiol. 1:82-88.
3. Murray, P. R., K. S. Rosenthal, and M. A. Pfaller. 2009. Staphylococcus and related gram-positive cocci, s. 211-214. In P. R. Murray, K. S. Rosenthal, and M. A. Pfaller (ed.), Medical microbiology, 6th ed. Mosby Elsevier Publishers, Philadelphia, PA.
4. Yrios, J. W. 1977. Comparison of rabbit and pig plasma in the tube coagulase test. J. Clin. Microbiol. 5 :221-224.
